大肠杆菌基因组DNA(Qubit实测) BNCC384314

经验优化与高级技巧篇

1. Qubit 定量与紫外分光光度计定量的区别 在常规实验室对核酸定量的检测中，常会用到紫外分光光度计（或 Nanodrop）和 Qubit 两种检测方法，二者在原理、准确性、操作难易等方面存在显著差异。 ①首先两者原理不同，紫外分光光度计基于核酸的紫外吸收特性来实现对核酸的定量：核酸（DNA/RNA）在 260nm 波长处有特异性吸收峰，且吸光度与核酸浓度成正比；Qubit 基于荧光染料与核酸特异性结合的原理来实现对核酸的定量，两者结合后荧光强度与核酸浓度成正比，通过标准曲线校准实现定量

结果分析篇

1. 琼脂糖凝胶电泳检测质粒为何有三条条带 通常完整的质粒电泳会看到多个电泳条带，这与质粒的多种形态有关。质粒可以有超螺旋，线性，开环等多种不同的形态，所以在电泳时常看到三条不同大小的条带，而最下面最亮的条带一般为超螺旋条带。 左图为电镜下的质粒形态，可以看到质粒有不同程度的超螺旋形态；右图为质粒电泳图   2. 质粒纯度不好 质粒中常见的污染杂质有蛋白质、基因组 DNA、RNA、乙醇等。这些杂质有可能是质粒提取过程中操作不当有关，比如： ①在加入裂解缓冲液后，剧烈震荡导致大肠杆菌基因

干货| CUT and Tag 技术全方位解答

凝集素，四聚体球蛋白，含有糖基结合位点，因此 ConA 是一种糖类结合蛋白。ConA 磁珠能与细胞膜上的糖蛋白结合，从而吸附细胞，使对细胞的实验操作可视化，减少在后续实验过程中的细胞的损失。 不建议使用离心法代替 ConA beads，因为离心法不适合于低细胞数，在洗涤的过程中，损失很大，而且大肠杆菌残留的 DNA 无法进行可靠的校准。 5.做 ChIP-seq 的时候不需要二抗，CUT&Tag 二抗的作用是什么？二抗是必须的吗？可以用带修饰（比如 HRP 修饰）的二抗