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- BNCC
- BNCC364562
- 2025年08月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
见包装
- 保质期：
见包装
- 英文名：
DH5α Chemically Competent Cell
- 库存：
现货
- 供应商：
广州市左克生物
- 规格：
冻存管；100μL/支；10支
产品简介:
品牌：BNCC
货号：BNCC364562
产品名称：DH5α化学感受态细胞
规格：冻存管；100μL/支；10支
品牌介绍:
北纳生物是一家专注于细胞、微生物菌种领域,集研发、生产和销售为一体的生物高科技企业,设有细胞库、微生物菌种库,细胞培养、菌种培养、分子生物学实验等实验室,全方位满足您的需求。
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文献和实验法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞：处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子)：带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞，用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态，然后与 pUC18质粒共保温，实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因，因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性，用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释，在含氨
型信息可以判断目的质粒是否可以使用这个感受态细胞来进行扩增，以及是否可以进行目的实验。例如 DH5α基因型：F-, φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA, supE44 , λ-, thi-1, gyrA96 , relA1。基因型信息中有 lacZΔM15，说明其表达产物可以与 PUC 质粒编码表达的β-半乳糖苷酶的α肽段实现α互补，因此可以选择用 DH5α感受态来扩增
4．操作步骤 1）大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落，接种于3～5ml LB液体培养中，37℃振荡培养12h左右，直至对数生长期。将该菌悬液以1:100～1:50转接于100ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20～30min测一次OD600nm，至OD600nm≤0.5时停止培养；(2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中，在冰上冷却20-30min，于4℃，4000r／
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