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- BNCC
- BNCC365207
- 2025年08月19日
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见包装
- 保质期：
见包装
- 英文名：
Escherichia coli DH5α（PESC-HIS）
- 库存：
现货
- 供应商：
广州市左克生物
- 规格：
冻干粉
产品简介:
品牌：BNCC
货号：BNCC365207
产品名称：DH5α（含pKK232-8大肠pKK系列表达质粒）大肠杆菌
规格：冻干粉
品牌介绍:
北纳生物是一家专注于细胞、微生物菌种领域,集研发、生产和销售为一体的生物高科技企业,设有细胞库、微生物菌种库,细胞培养、菌种培养、分子生物学实验等实验室,全方位满足您的需求。
说明：1、细胞&菌种等产品规格有多种时，默认发第一种规格，不同规格价格不同，具体找客服联系； 2、北纳细胞&菌种货期可参考：冻存细胞现货当天可发出。复苏细胞需要7-15个工作日；菌种一般默认发冻干粉；其他如菌液或者平板等形式需要7-15个工作日。
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文献和实验相关专题 蛋白表达技术全攻略 一、大肠杆菌 表达载体 大肠杆菌表达载体都是质粒载体。作为表达载体首先必须满足克隆 载体的基本要求，即能将外源基因运载到大肠杆菌细胞中。在基本骨架的基础上增加表达元件，就构成了表达载体。各种表达载体的不同之处在于其表达元件的差异。 1.表达融合蛋白的表达载体 当蛋白质表达以后，有效的分离纯化或分泌就成为获得目标蛋白的关键因素。通过以融合蛋白的形式表达，并利用载体编码
于质粒的纯化。 recA1 减少克隆DNA的非特异性重组。 DE3 编码T7 RNA聚合酶，用于诱导T7-启动的表达系统的表达。 DeoR 可以高效吸收大片段DNA，有利于文库的构建。 Tn10 含 有四环素抗性的转座子。 OmpT 表明大肠杆菌缺乏外膜蛋白酶。缺乏外膜蛋白酶的菌株可以降低表达的外源蛋白在细菌中被降解的程度，有利于获得完整的重组蛋白。 PLys 含编码T7溶菌酶的质粒；通过抑制T7 RNA聚合酶基础表达水平来降低T7启动的表达体系的基础表达水平。 ArgF 由于突变
产物双酶切后回收，在T4DNA连接酶作用下连接入载体。（三）获得含重组表达质粒的表达菌种1、将连接产物转化大肠杆菌DH5α，根据重组载体的标志（抗Amp或蓝白斑）作筛选，挑取单斑，碱裂解法小量抽提质粒，双酶切初步鉴定。2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确，进入下步操作。否则应筛选更多克隆，重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。3、以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。（四）诱导表达1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB（含Amp50μg/ml）中37℃过夜培养。2、按1∶50比例稀释
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