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- 2025年07月16日
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- 保质期：
1年
- 库存：
10000
- 供应商：
上海信裕
- 保存条件：
室温保存
产品包装：试剂盒组成 D1800-50 D1800-100 储存条件
RNase A 1ml 2ml -20℃
蛋白酶K 1ml 2ml -20℃红细胞裂解液 120ml 120ml×2 RT
溶液A 15ml 2 5ml RT溶液B 15ml 25ml RT
漂洗液 15ml 15ml×2 RT洗脱液 15ml 30ml常用PCR引物 RT
吸附柱 50个 100个 RT收集管 50个 100个 RT说明书 1份 1份 RT
注意事项：
1、本试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。
2、常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等，需注意的是，如欲制备大分子量血液基因组DNA，可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝，因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时，有常用PCR引物PCR扩增抑制现象。
3、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DN**段较小且提取量也下降。
4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影响效果。
5、绝大多数哺乳动物的全血如人全血中的红细胞无核，故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞，以免影响白细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量减少为5-20ul，不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。
6、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul，体积过小会影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也常用PCR引物有影响，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的 pH值调至此范围)，pH值低于7.0会降低洗脱效率。
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文献和实验随机引物 适用于长的或具有发卡结构的 RNA。适用于 rRNA、mRNA、tRNA 等所有 RNA 的反转录反应。主要用于单一模板的 RT-PCR 反应。 Oligo dT 适用于具有 PolyA 尾巴的 RNA。（原核生物的 RNA、真核生物的 Oligo dT rRNA 和 tRNA 不具PolyA 尾 巴。）由于 Oligo dT 要结合到 PolyA 尾巴上，所以对 RNA 样品的质量要求较高，即使有少量降解也 会使全长 cDNA 合成量大大减少。 基因特异性引物 与模板序列互补
1、引物最好在模板 cDNA 的保守区内设计 DNA 序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在 NCBI 上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。 2、引物长度一般在 15-30 碱基之间 引物长度（primer length）常用的是 18-27bp，但不应大于 38bp，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于 Taq DNA 聚合酶进行反应。 3、引物 GC 含量在 40%~60% 之间，Tm
多元PCR(多重PCR，Multiplex PCR，MPCR) 是指在一个 PCR 反应中使用一个模板和几对引物同时扩增多个目的片段的 PCR 反应。这项技术非常有用，他不仅可以提高 PCR 的产率还能提高?DNA?样品的利用率。 另一种形式的 MPCR 是组合 PCR, 组合 PCR 是在同一 PCR 反应中使用几个不同的模板和几对引物。多元 PCR 和组合 PCR 往往被当作同义词使用。 设计策略 MPCR 要求所有的引物对在同一条件下扩增其各自的特异序列。大多数多元 PCR 反应 局限
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