- ￥158
- AMEKO
- 中国
- RC86440-50mL
- 2025年09月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 库存：
99
- 供应商：
鹿森生物
- 规格：
50ml
用途：培养细胞的冻存
产品简介:
冷冻保存细胞系的优点:
1、减少基因漂移;
2、减缓细胞系的衰老;
3、稳定表型；
4、减少微生物污染及交叉污染机会等。细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的品体形成，减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤，从提高细胞复苏时的存活率，细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得1:10~1:20的稀释，稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜，这是因为当低温保护剂稀释 10~20倍以后，该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。
通用细胞冻存液(无血清)主要由培养基、DMSO 等组成，不含血清，是一种经典的无菌冻存液，用干各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考):
1、培养细胞至对数生长晚期，显微镜观察其外观、形态、有无污染等，取状态良好的细胞进行冻存操作:如为贴壁生长细胞，用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化，进行细胞计数;如为悬浮生长细胞，进行细胞计数。
2、500~1000g 离心 5min，弃上清。
3、加入适量的通用细胞冻存液，重悬细胞，使细胞浓度达到1~10x10ml，置于冻存管中，密闭、不要拧的太紧，避免弯曲变形。
4、一般遵循 1℃/min 的速率进行冷冻;亦可采用4℃ 20min，-20℃ 30min，-70℃过夜，最后置于液氮罐中长期存储。
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文献和实验。 4、培养细胞时，如何去除血清来源的外泌体？ 多数情况下，细胞在体外培养时需要血清，而血清中一般都含有外泌体，为避免血清对细胞外泌体的污染，可采用以下两种方法： 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体； 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清（或者外泌体专用培养基）在什么时候使用？ 使用无外泌体血清培养基：细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后，细胞汇合度在60% - 70% 时，移去原有含血清的培养基，换成新鲜的无外泌体血清培养基，继续
第一步细胞培养：外泌体来自于细胞，必须先从源头抓起，高质量的细胞及上清液产出高质量的外泌体。 收集上清的细胞培养原则：在细胞健康正常生长的前提下，尽可能的减少血清外泌体或是不使用血清。 培养条件 优点 缺点 1 含血清的完全培养基 ✘ 血清中含有大量异源外泌体 2 含去外泌体血清的培养基 ✔ 营养相对丰富 去外泌体血清难以做到 100% 的去除的，因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体 3 基础培养
一段时间的生长后收集细胞上清液。但是这两种方法都会存在一定的不足的，去外泌体血清难以做到 100% 的去除的，因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体，而外泌体专用无血清培养基，也不是适合所有的细胞，常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长，而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了，所以也需要一些预实验的摸索。 还有，那些 DMEM、1640、F12 的基础培养基是否可以替代血清或者外泌体专用无血清培养基呢？这样是不行的。因为细胞在这些基础培养基的环境下，是处于饥饿状态的，细胞会将培养
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