细胞冻存液(含血清)

细胞冻存液以进口FBS、DMSO为主要原材料配制,适用于是各种哺乳动物原代细胞、传代细胞和杂交瘤细胞等的冻存保种。

本产品为即用型试剂,储存稳定,使用方便,细胞存活率高。

 

使用方法: 

 

细胞冻存步骤

1、 常规方法收集对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于试管中。

2、 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存的细胞数。

3、 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rpm离心5分钟,收集培养细胞沉淀,彻底弃去离心管中的上清液。

4、 加入适量的本冻存液于离心管中,使细胞浓度约为1*106-1*107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。

5、 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中。

6、 密封标记后按常规操作流程依次经4℃,-20℃,-80℃直至液氮罐或用程序降温仪逐级降温冻存。

 

冻存细胞复苏步骤

1、 从冰箱中取出冻存的细胞,立即置于37℃水浴槽中快速解冻。

2、 待冻存管中的细胞混合液完全融化后,立即加入1ml细胞培养基于冻存管中与细胞混合,将其中的混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中,1000rpm离心5分钟,收集冻存细胞沉淀,移去上清液（注意勿将细胞沉淀倒掉）。

3、 加入适量的新鲜培养基,使用移液管缓缓加入细胞沉淀中,轻柔混匀,将混匀好的细胞移至事先准备好的培养容器中。

4、 镜检观察,待细胞状态恢复后可进行其他研究或者培养处理。

 

保存条件：

 

-20℃保存,2年有效。

 

注意事项：

1、 取用冻存液均要在超净工作台内无菌操作 。

2、 初次使用融化后可在2-8℃保存至少1个月,少量蛋白析出不影响冻存效果。 

3、 冻存时从室温可快速降到0℃,再降温时一般按每分钟降温1～2℃,待降至-80℃以下时可放入液氮中,在液氮中细胞可保存数年或更长时间.

4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。