ITS+液体培养基补充剂（100×）

类器官培养与应用——肠类器官

、在立体显微镜下，可以看到明显的 3D 结构。使用 200μl 移液器吸头从每个孔中收集球状体，并将大约 50 个球状体集中到 5ml 微量离心管中。   中肠和后肠球状体生长成人肠类器官 11、收集球状体后，将微量离心管垂直放置在管架上 10min，此时球体通过重力沉降到离心管底部。吸出上清，控制总体积在 25μl 左右。 12、将冻存的 Matrigel 在 4℃ 下过夜解冻，添加 B-27 补充剂(终浓度 1×)、R-spondin1 (终浓度 500ng/ml)，Noggin (终浓度100

树突状细胞及其培养基

树突状细胞培养操作步骤 准备补充剂 将补充剂混合物在 15~25℃ 解冻。在无菌条件下用移液枪小心地将补充剂混合物混匀。然后，把补充剂混合物全部加到基础培养基中。盖上瓶子，轻轻混匀直到形成均一的混合物。DC生成培养基所附带的相应的细胞因子组合包含有成分A和B，它们都是以100X 的原液状态运输的。 注意：此时不要将化合物B加入培养基中。 DC基础培养基不带细胞因子，因此使用时必须另外自行添加。 新鲜分离的单核 DC 细胞的传代 对于新鲜分离自外

血细胞计数原理你真的懂吗？

，此时只可记为一个细胞。如果团块很多，则可能需要重新吹打甚至消化直至绝大多数细胞为单个细胞血细胞计数器计数原则计算细胞数：血细胞计数器的机构示意图 由血细胞计数器的构造可以看出，血细胞计数器每个大方块可以容纳的体积为： 1 mm2×0.1 mm = 0.1 mm3 = 10-4 cm3 = 10-4 ml也即每个大方块的体积为万分之一毫升，因此在计算每毫升液体中的细胞数时需要乘以104。在常规没有使用台盼兰染色时，可以以下面公式计算每毫升培养基中细胞的个数：每毫升培养基中细胞的个数 = 每个方块内细胞