- 询价
- 简石生物
- TD427-5
- 2026年07月15日
16 年金牌会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 技术资料
- 供应商：
简石生物
- 规格：
5次
使用简石生物的质粒DNA快速提取试剂盒，市场首创不需要结合液、平衡液、异丙醇等方法辅助的新型质粒提取产品，速度及操作更加便捷，碱式裂解细胞，全新的P3中和完成即可过柱收集质粒，产量与质量与市面上的热门质粒试剂盒产品具有相当竞争力，条带更加清晰，RNA残留少，能够更好的应用在后续下游应用中。全流程基本可保证在15min完成实验。
产品特性
- DNA纯度：获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序、转染等各种分子生物学实验。一般情况Abs260/280≥1.8，Abs260/230≥2.0，内毒素含量小于1EU/μg 。
- 质粒DNA产量：每次可提取到约100μg，主要依据质粒的拷贝数，培养物的生长环境、细胞 OD值等因素。
- 质粒DNA大小：最高可达25kb。
- 洗脱体积：≥25μl。
- 操作温度：室温（15-30°C）。
- 操作时间：15分钟。
产品亮点
- 独有的显色反应，可以直接观察到细胞裂解中和的程度，极大地方便操作者判断其状态。
- 快速、方便，不需要使用有毒的苯.酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好，内毒素含量极低，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序、转染等各种分子生物学实验。
此产品仅供科研使用。
溶液制备
- 第一次使用时，将试剂盒中全部RNase A加入溶液P1后（终浓度100μg/ml）置于2-8℃保存。如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有微量RNA残留，在溶液P1中补加RNase A即可。
- 5次反应的质粒DNA洗涤液2，应添加20ml 95%的乙醇到5ml的质粒DNA洗涤液2中。100/200次反应的质粒DNA洗涤液2，应添加88ml 95%的乙醇到23ml的质粒DNA洗涤液2中，加入后请及时在方框内打钩标记，以免多次加入!
- P3在使用前需要在冰上预先冷却。
操作步骤
1. 取1-5ml过夜培养的菌液（OD值≤5得率最.优，需满足此条件，过多菌量会导致裂解不完全，或者堵纯化柱的状况）转移到带盖收集管中全速离心力下离心30秒尽可能多地去除上清，收集菌体。
2. 用300μl溶液P1重悬菌体沉淀，可用吸头反复吹打或涡旋振荡至彻底悬浮。（如果有未彻底混匀的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低。）
3. 加300μl溶液P2，温和地上下翻转数次使菌体充分裂解，至液相澄清透亮，室温放置≤5分钟。（温和地混合， 不要剧烈振荡，以免基因组DNA剪切断裂！所用时间不应超过5分钟！以免质粒受到破坏。此 时菌液应变得清亮粘稠，如果菌体少，很快清亮粘稠后就可以做下一步。 ）
4. 加500μl溶液P3，立即温和地上下翻转数次，至红色液相完全消失，变为黄色，中和完全后会出现黄色絮状沉淀。（中和完全后溶液呈现黄色，且没有形成结团的现象，中和物松散均匀）
5. 将上述中和的裂解物在 ≥16,000 xg 的离心力下离心 5 分钟。
6. 将步骤5中的~900μl上清转移到干净的1.5ml离心管内。（不要碰到下面的黄色沉淀）
以下步骤可以通过真空负压的方式，也可以通过离心的方式进行操作（负压设备，所用真空泵及真空多联器推荐使用简石生物™技术有限公司设备产品 ）
负压操作步骤
1. 将2号PX纯化柱连接到负压真空多联器上，倒入第6步的混合液，打开真空开关使液体完全通过纯化柱。
2. 关掉真空开关，倒入800μl质粒洗涤液1到2号PX纯化柱内，打开真空开关，让液体完全通过纯化柱。
3. 关掉真空开关，加入800μl质粒DNA洗涤液2（请先检查是否已加入乙醇!）到2号PX纯化柱内，打开真空开关让液体完全通过纯化柱。
4. 将2号PX纯化柱套在收集管上，然后放置在台式离心机上在≥10,000xg条件下空转2分钟以去除残留乙醇。
5. 将2号PX纯化柱套在一个干净的1.5ml离心管内，添加25μl-50μl的质粒DNA洗脱液到纯化柱基质上。（洗脱液事先在65-70℃水浴中预热，洗脱效果更好），室温放置≤5分钟，在≥10,000xg条件下离心1分钟来洗脱质粒DNA。
离心操作步骤
1. 将2号PX纯化柱套在2ml收集管上，倒入第6步的混合液，10000xg离心力下离心1分钟，去除滤出液。
2. 加入800μl质粒DNA洗涤液1，10000xg离心力下离心1分钟，弃掉废液。
3. 加入800μl质粒DNA洗涤液2 (先检查是否已添加乙醇) 10000xg离心力下离心1分钟，弃掉废液。
4. 将2号PX纯化柱套在收集管上，然后放置在台式离心机上在≥10,000xg条件下空转2分钟以去除残留乙醇。
5. 将2号PX纯化柱套在一个干净的1.5ml离心管内，添加25μl-50μl的质粒DNA洗脱液到纯化柱基质上。（洗脱液事先在65-70℃水浴中预热，洗脱效果更好），室温放置≤5分钟，在≥10,000xg条件下离心1分钟来洗脱质粒DNA。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
技术资料质粒DNA超快速小量提取试剂盒
询价
