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充足
- 英文名:
EZFast RNA&Protein Purification Kit PLUS
- 保质期:
有效期12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
- 供应商:
EZBioscience
- 保存条件:
本产品所有组分建议于室温(15 ~ 25°C)运输,DNA Depletion Columns收到后需置于4°C保存,其余组分均置于室温保存,有效期12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
- 规格:
50 Preps
产品简介
EZ-press RNA & Protein Purification Kit PLUS可从同一动物组织或细胞培养样品中同时纯化总RNA和总蛋白质。与其他需要将生物样品分成两份再分别处理的流程不同,本试剂盒能够在40 min内从一份完整的样品中同时纯化得到高纯度的RNA和蛋白质,显著节省了样品的用量和样品准备所需的物料和时间。
本试剂盒取代了目前耗时、复杂的方法,无需乙醇沉淀、大量洗涤步骤或使用苯酚、氯仿等有毒物质。且本试剂盒包含DNA Depletion Columns,能够快速、充分地去除基因组DNA,纯化得到的RNA纯度高,可用于多种下游应用,包括:cDNA合成、RT-PCR、RT-qPCR、Northern、dot和slot blot分析等,以及引物延伸、RNase/S1核酸酶保护和基因芯片检测等。纯化的蛋白质适用于多种蛋白质应用,包括:SDS-PAGE、Western Blot以及LiquiChip®分析等。
产品组分
|
组分 |
EZB-RP2-T (6 Preps) |
EZB-RP2 (50 Preps) |
|
RP Lysis Buffer |
3 ml |
28 ml |
|
Wash Buffer 1 |
5 ml |
40 ml |
|
Wash Buffer 2*1 |
1 ml |
6 ml |
|
Elution Buffer |
1 ml |
10 ml |
|
DNA Depletion Columns (with Collection Tubes) |
6 Preps |
50 Preps |
|
RNA Columns (with Collection Tubes) |
6 Preps |
50 Preps |
|
PP Buffer |
6 ml |
45 ml |
|
PD Buffer*3 |
1 ml |
10 ml |
注: *1. 首次使用Wash Buffer 2前,须加入瓶身标签所示体积的无水乙醇(Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4),充分混匀后才可使用;*2. 本试剂盒中的Elution Buffer为Nuclease-free ddH2O;*3. 每次使用PD Buffer前,须加入终浓度为50 mM的DTT或1%终浓度的巯基乙醇,含DTT的PD Buffer须在-15 ~ -25°C冷冻保存,含巯基乙醇的PD Buffer可于室温稳定保存不超过30天,如需长期保存须冻存。
保存条件
本产品所有组分建议于室温(15 ~ 25°C)运输,DNA Depletion Columns收到后需置于4°C保存,其余组分均置于室温保存,有效期12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
产品特点
- 适用范围广:能够从大部分的动物组织和细胞中提取得到高质量的RNA和总蛋白质;
- 简单、快速:能够在40 min内从一份完整的样品中同时纯化得到高纯度的RNA和蛋白质;
- 纯度高、完整性高:A260/280和A260/230基本在2.0左右,且得到的RNA具有较好的完整性;
- 安全无毒:不含苯酚等,无需氯仿、异丙醇、DEPC水等致癌物质,对身体无害;
- 基因组充分去除:配有DNA清除柱,可有效去除DNA污染;
- 所需样品少:最低可提取20万细胞或者2 mg组织(部分组织)的RNA和总蛋白质。
注意事项
1. Wash Buffer 2首次使用前加入瓶身标签所示体积的无水乙醇并充分混匀(Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4)。
2. Elution Buffer使用前建议分装为3 ~ 4份保存,以减少污染的概率。
3. RNA提取及蛋白沉淀须在室温中进行,提取及沉淀过程中不可置于冰上,RNA洗脱及蛋白重悬后可置于冰上。
4. 关于组织及细胞用量,可参考下表:
|
RP Lysis Buffer |
细胞 |
心脏、肝脏、肾脏、脾脏、肺等 |
|
450 µl |
2 × 105 ~ 2 × 106 |
2 ~ 10 mg |
5. 为了您的安全和健康,请穿戴实验服、一次性乳胶手套和一次性口罩。
代表性实验结果
1. 使用本试剂盒提取不同细胞系及组织RNA,结果如下:
|
Sample |
Concentration (ng/µl) |
260/280 |
260/230 |
|
293T |
233.3 |
2.05 |
2.14 |
|
A549 |
316.5 |
2.04 |
2.12 |
|
Lung |
344.6 |
2.02 |
2.10 |
|
Liver |
292.6 |
2.01 |
2.10 |

由上述结果可见,本试剂盒能够从细胞和组织样品中提取得到高纯度的RNA。
2. 使用本试剂盒提取不同细胞系及组织总蛋白,结果如下(注:下图中同种样品的对照组和实验组为同时提取和进行SDS-PAGE的实验结果,不同的样品的结果并非同一次实验的结果,为了便于展示,特此拼合在同一张图中):

由上图SDS-PAGE结果可见,本试剂盒提取得到的细胞和组织蛋白质的蛋白电泳图谱与1× Loading Buffer直接煮样得到的蛋白电泳图谱高度一致。
上述RNA和蛋白电泳的结果表明,使用本试剂盒可从同一个动物组织或细胞培养样品中同时纯化得到高纯度的总RNA和总蛋白质,并用于后续实验。
相关详细信息,请查看产品说明书。
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