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北京百泰派克生物科技有限公司
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蛋白质谱鉴定实验视频
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dànbáizhì谱鉴定实验视频的技术解析与应用价值
dànbáizhì谱鉴定实验视频作为现代蛋白zhìzǔxué研究的重要可视化载体,完整记录了从样品制备到数据分析的全流程技术细节。这类视频通常涵盖液相色谱分离、质谱离子化、质量分析器扫描等核心环节,通过动态影像直观展示肽段碎裂模式、母离子选择策略以及数据库检索原理。在实验操作层面,dànbáizhì谱鉴定实验视频能够清晰呈现胶内酶解点样技巧、LC梯度优化方法,以及质谱参数(如碰撞能量、分辨率设置)的实时调整过程。对于科研新手而言,这类视频可显著降低技术门槛,例如展示如何通过MS/MS谱图识别b/y离子系列,或演示MaxQuant、Proteome Discoverer等软件的实际操作界面。
从技术标准看,高质量的dànbáizhì谱鉴定实验视频需满足三个要素:分辨率不低于1080p以显示质谱界面参数细节、包含同步的专家解说音频,以及标注关键时间节点的技术参数(如HPLC流速从300 nL/min切换至600 nL/min的具体时刻)。部分先进实验室还会采用多机位拍摄,同时捕捉质谱仪控制界面和实验员操作动作。值得注意的是,这类视频的制作成本差异较大,具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定。目前主流期刊如《Nature Protocols》已要求作者提交配套的dànbáizhì谱鉴定实验视频作为方法学补充材料,这反映出学术界对该类技术可视化资源的认可。
在质量控制方面,dànbáizhì谱鉴定实验视频必须包含标准品(如BSA酶解肽段)的质谱验证片段,用于证明系统灵敏度达到fg/μL级别。视频中还应明确标注仪器型号(如Q-Exactive HF-X或timsTOF Pro 2),因为不同质量分析器的采集速度直接影响DDA和DIA策略的选择。有研究显示,观看zhuānyè制作的dànbáizhì谱鉴定实验视频可使研究人员的数据解析错误率降低37%,特别是在区分同位素峰和加合离子峰等疑难问题时xiàoguǒxiǎnzhù。
常见问题:
Q1. 如何通过dànbáizhì谱鉴定实验视频判断离子淌度分离(TIMS)的效果?
A:需观察视频中漂移时间分布图的峰形对称性,理想状态下各肽段的DT峰应呈高斯分布,FWHM(半峰全宽)值差异不超过15%。若出现拖尾现象,提示载气纯度或电场稳定性存在问题。
Q2. dànbáizhì谱鉴定实验视频中DDA和DIA模式切换时有哪些关键参数需要重点关注?
A:DDA转DIA时需注意隔离窗口宽度(通常设置为4-10 m/z)和触发阈值(建议Base peak intensity >1e4),视频应清晰展示MS1预扫描的累计次数对母离子选择的影响。
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文献和实验酶抑制剂、假想蛋白210 表达上调、下调与消失变化在脊髓损伤中居极其重要地位。 《急性脊髓损伤蛋白质的双向电泳分析和质谱鉴定》下载 点击这里下载
基于质谱的蛋白质鉴定,第6节:MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
物干燥,连续洗涤使用预制型的薄层基质。该方法为精确和灵敏的MALDI检测创造了最佳条件。然而,这种样品制备方法制备的样品不能承受激光辐射,会被迅速漂洗。因此,该方法不适用于PSD光谱的蛋白质谱鉴定,因为PSD光谱法通常每个片段质量范围需要多达100甚至以上次数反复的激光辐射。 如果在分析之前,使用小型吸附柱对较大体积的肽混合物进行浓缩,抑或通过向肽混合物中添加少量反相色谱珠的方式进行批量吸附。而进行批量吸附,只需要将磁珠吸附到的肽混合物进行洗涤,即可获得肽混合物,然后转移至上样处并干燥即可。这种
Cell Reports:四川大学卢克锋研究员团队揭示细胞自噬调控的 N-乙酰化修饰
的阶段为上游自噬体形成阶段。 Nat3 酶功能展示以及其敲除导致自噬阻断确证。(图片来源:Cell Reports) B 型 N-乙酰化酶 Nat3 调控自噬过程 那 B 型 N-乙酰化酶 Nat3 调控自噬的具体分子机制是什么呢?研究人员通过文献筛查、自噬功能分析、质谱鉴定和修饰突变等方法,发现 Nat3 的两个修饰底物蛋白质,细胞骨架 Actin 和融合相关分子 Vps1。研究人员发现这两个分子的确可以被 Nat3 进行 N-端乙酰化修饰,而且该修饰对其参与自噬的功能是至关重要的。 总结
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