【Exosupur®纯化试剂盒】Exosupur细胞上清、尿液等样本外泌体纯化试剂盒-体验装产品图

【Exosupur®纯化试剂盒】Exosupur细胞上清、尿

液等样本外泌体纯化试剂盒-体验装
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  • ¥807.50
  • 恩泽康泰
  • ES911
  • 2026年06月07日
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    • 供应商

      广州市左克生物

    • 规格

      1ml*1pcs

    Exosupur ® 外泌体纯化试剂盒,是专门用于从细胞上清、尿液、细菌培养上清等非复杂样本中提取小细胞外囊泡sEV的纯化试剂盒。试剂盒采用分子排阻色谱的原理,根据被分离样本中组分的分子尺寸大小实现外泌体的分离。本试剂盒具有快速、高效、操作简单、对设备要求低等特点,从上样到馏分收集约30-60min内完成外泌体的分离纯化。提取的外泌体产物质量稳定可靠、蛋白污染程度低,可用于蛋白提取分析、RNA提取分析、细胞功能检测等下游生物学实验。 针对中小体积到大体积细胞上清等成分简单生物样本sEV分离提供系统性解决方案。

     

    概述

    关于外泌体纯化方法,国际细胞外囊泡协会(ISEV)的最小实验要求(MISEV2023)中根据不同的原理进行外泌体分离时,每种方法均有优缺点:

    分离方法 优缺点
    超速离心(DC) l 常见的外泌体分离手段; l 但首先,需要特殊的大型超速离心仪器; l 其次,为提高得率,就需要更长的离心时间或者更大的离心力,但是这样势必会增加产物中杂蛋白(通常是密度跟EVs相近或更高的蛋白质)含量; l 再次,DC可能导致EVs的团聚或破损。此外,文献报道的DC得率介于2-80%之间,可以想象不同的离心条件得到的产物其生化组成难以保持一致,稳定性较差; l 而且,超速离心机操作复杂(全过程大约需要3-9小时),通量有限,仅适合科研用途,难以满足临床应用的需求。
    密度梯度离心(DGC) l 能够有效去除样本中的杂蛋白,尤其适合对产物纯度要求较高的应用。 l 但是,该方法操作非常复杂(全流程16-90小时不等),得率偏低(10%左右),通量严重受限,仅适合科研用途。
    免疫捕获(IC) l 产物纯度高; l 但是,依赖抗原表达,存在亚群的偏好性; l 另一方面,磁珠抗体价格昂贵,不适合处理大体积样本; l 最后,在使用抗体磁珠处理血浆这类样本时,试剂盒官方推荐先建议采用SEC试剂盒对样本进行一个预纯化,变相说明免疫捕获法对于复杂样本的直接处理能力并不理想。
    聚合物沉淀(PEG) l 操作简单,成本低廉,产物EVs浓缩倍数可达50倍,而且对样本体积几乎没有限制。 l 但是,选择性偏低,产物存在大量的PEG分子和杂蛋白,珍贵的临床样本就不建议考虑这种分离方法。
    超滤(UF) l 能够有效浓缩EVs,倍数可高达200倍以上。 l 一般仅作为一种浓缩手段配合其他方法使用。
    分子尺寸排阻色谱法(SEC) l 没有剪切力等物理化学因素,保留EVs的完整性和生物活性,不会对EVs造成任何影响,粒径均一,重复性好,而且操作简单快捷,能够有效去除样本中粒径较小的杂质颗粒; l 但是,产物浓度偏低,因此一般需配合超滤浓缩; l 而且,上样体积受柱床体积限制,因此如果是大体积样本可先浓缩再上样。

    分子尺寸排阻色谱法SEC在诸多分离方法中一骑绝尘,因其优良的性能脱颖而出,获得广大EVs领域专家的青睐,在EVs专刊JEV中的研究占比日益提高。 恩泽康泰开发的基于SEC原理的外泌体分离纯化专利产品——Exosupur ® 试剂盒,自推出以来经受了市场和EVs领域专家的检验,在操作简便性、性能、稳定性和性价比上获得一致好评。

    规格

    • Exosupur ® sEV分离kit-10ml排阻柱 规格: ES910【10ml*1pcs】 1)单次上样 10ml*5 次重复 =50ml 应用: 适用于细胞上清、尿液等非复杂的大体积样本。搭配 ES8500 细胞上清高倍浓缩试剂盒使用,总处理量高达 1.5L-2.5L • Exosupur ® sEV分离kit-1ml排阻柱 规格: ES911 & ES914 1 ) ES911【1ml*1pcs】 ,单次上样 1ml*5 次重复 =5ml 2 ) ES914【1ml*4pcs】 ,单次上样 1ml*4 根 *5 次 =20ml 应用: 适用于非复杂细胞上清、尿液等浓缩后的小体积样本 sEV 纯化( 5-20ml ) • Exosupur ® sEV分离kit-3ml排阻柱 规格: ES933 1 ) ES933【3ml*3pcs】 ,单次上样 3ml*3 根 *5 次重复 =45ml 应用: 适用于非复杂细胞上清、尿液等浓缩后的 45ml 以内样本 sEV 纯化 推荐搭配购买排阻柱伴侣:支架和适配器等 配件-以提升操作通量或方便加液,链接: Exosupur ® 排阻柱伴侣-支架&适配器配件-恩泽康泰

    应用

    • 可兼容细胞上清、尿液等不同样本类型; • 可用于不同样本的高通量测序、质谱等组学研究,以及下游的PCR、WB、WLISA验证等,纯度更高,杂质干扰更少,定量更准确; • 可用于细胞、动物的功能机制研究,不影响外泌体性质和活性、不引入聚集和其他杂质等影响; • 可用于工程化外泌体改造后再次纯化等研究; • 可用于纯化相关的方法学开发中作为对照方法使用。

    优势

    • 操作简便:无需特殊设备,柱平衡、上样、外泌体收集、外泌体浓缩四步操作,从上样到分离完成仅需30 -60 min。升级后的产品配套柱平衡或清洗的适配器,让操作更简便,解放双手; • 性能优越:对于细胞上清样本可回收最高达95%,杂蛋白去除率99%以上; • 稳定性高:只回收固定尺寸范围的外泌体,产物粒径范围窄;实验受外界因素波动的影响比较小;不引入其他的物理化学因素,可以保持完整的外泌体形态和功能; • 性价比高:可对排阻柱进行清洗再生,重复5次使用,可处理的样本量大; • 质量可靠:Exosupur ® 系列sEV纯化试剂盒高效便捷,已辅助客户发文100篇+,经受了行业专家的检验,获得北京市新技术新产品认定。

    产品性能

    Exosupur ® 分离的细胞上清小细胞外囊泡sEV TEM电镜、WB和nanoFCM粒径表征。

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    针对细胞上清样本,Exosupur ® 最高可回收95%的外泌体,杂蛋白去除率99%以上。下左图为1ml排阻柱(ES914、ES911)分离1mL浓缩细胞上清的效果,下右图为3ml排阻柱(ES933)分离3mL浓缩细胞上清的效果,下第二排为10ml排阻柱上样浓缩的10ml细胞上清的效果。高纯度外泌体更有利于RNA组学、蛋白组学及细胞功能学和在体实验研究。

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    图示

    Protein K和RNase A双酶消化进一步证实了Exosupur ® 得到的RNA更多的是来源于囊泡,而囊泡外的游离RNA检测值更低。

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    Exosupur ® 分离的外泌体进行蛋白质组研究时,可检测到丰富的囊泡特异的标志物蛋白,表明外泌体纯度高,可以更多检测外泌体来源的蛋白;可检测到比较多的蛋白数量,有利于不同样本之间的差异分析;与已发表文章、数据库具有较多overlap,表明数据可靠,能够准确的对外泌体蛋白进行研究。

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    对比不同的SEC分离方法:经过Exosupur ® 试剂盒收集的馏分,具有最高的荧光强度(A)和最低的蛋白质浓度(B和C),表明Exosupur ® 具有最有效的EVs回收率和最低的游离蛋白质污染。

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    常见问题

    Q : Exosupur ® 外泌体纯化试剂盒能不能配套类似塑料试管架子,方便使用? A : 我们有配套的排阻柱支架(ES914S和ES933S),需要单独购买。支架链接: Exosupur ® 排阻柱伴侣-支架&适配器配件-恩泽康泰 Q : Exosupur ® 外泌体纯化试剂盒每次多倍柱体积PBS或清洗液冲洗,能不能配套有个缓冲器,不用反复添加? A : 我们有配套的适配器(ES91A和ES93A),需要单独购买。适配器链接: Exosupur ® 排阻柱伴侣-支架&适配器配件-恩泽康泰 Q : 适配器跟排阻柱无法严丝合缝,存在漏液? A : 调整一下适配器的方向,适配器插的稍微紧一点,正常现象不影响使用。 Q:该试剂盒分离外泌体需要自备的内容有哪些? A:1)无菌PBS溶液(须用0.22μm滤膜过滤,建议新鲜配置或采购已过膜的PBS,4°C冰箱保存的PBS溶液需先平衡至室温); 2)20%无水乙醇(须超声条件脱气20min或配置好后静置过夜); 3)超滤管(截留分子量100kD); 4)收集管(1.5mL EP管和15mL离心管); 5)样品(上样前需平衡到室温)。 Q:样本收集完了,颜色还在中间,是否有问题? A:按照操作说明来做,就没问题,一般是颜色滞后,因为颜色都是小分子成分,会靠后出来,外泌体会先流出,故不能以颜色作为外泌体收集的判断。 Q:用完了是直接用封闭液冲洗,还是2倍柱体积PBS冲了再用1倍柱体积封闭液冲? A:如果本次接着用就不用封闭液清洗;如果本次不用了,需保存起来下次用,那么本次就用PBS冲洗后再封闭液冲洗。 Q:分离后的外泌体如何保存? A:外泌体保存问题跟分离方法无关,是由其本身特性决定的,如果条件允许最好使用新鲜的外泌体进行实验,冻存的外泌体容易产生团聚并出现沉淀。实际研究中,外泌体功能实验往往需要大量的外泌体不得不分批提取保存时可-80℃保存;但做biomarker研究时,如RNA组学等,提取外泌体后需尽快完成RNA提取等后续实验。 Q:Exosupur®可以分离细菌来源外泌体吗? A: 可以分离细菌培养上清来源外泌体,操作教程如下:

    图示
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    ES914分离幽门螺杆菌外膜囊泡OMV引用文献 :Wei S, Li X, Wang J, et al. Outer Membrane Vesicles Secreted by Helicobacter pylori Transmitting Gastric Pathogenic Virulence Factors. ACS Omega . 2021;7(1):240-258. Q:Exosupur®可以分离植物来源外泌体吗? A:可以,可以参考: Q:Exosupur®可以分离牛奶来源外泌体吗?

    A:可以,可以参考:

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    • 恩泽康泰进军家畜外泌体研究领域——全面解锁猪/牛/羊/鸡外泌体研究

      为了聚焦业务需求、提供更好的外泌体科研服务质量,恩泽康泰一向不贪婪,一心搞“人/小鼠/大鼠”临床科研外泌体服务产品,所谓干一行爱一行干好一行,直到今天我们在外泌体组学领域已经与临床客户深度合作发表了150+ SCI文章(其中部分高水平SCI文献已解读,请查阅《合作成果》合辑)。 从2017年6月1号成立到2024年3月底近7年耕耘,从最初开发的专利Exosupur®外泌体纯化试剂盒到集细胞上清/血浆/二次纯化袖珍柱Exosupur®家族,从单纯的纯化试剂盒到集核酸负载

    • 干货:外泌体研究实操中的常见问题解答

      沉淀。 5、开封后的 ECS 试剂有沉淀出现是否可以继续使用? 答:沉淀物如果是结晶状,建议 56 度水浴摇晃混匀。如果结晶消失,则可以继续使用,少量沉淀不影响提取效果。 6、试剂提取试剂加溶液 B后无豆花状固体,此时是否可以继续实验?   答:不可以,必须明确在看到豆花状沉淀,溶液变透明后才可进行下一步操作。此时需要继续加入溶液B,并在37度水浴加热,溶液看到豆花状沉淀。 7、如何选择血浆和脐带血样本进行外泌体研究? 答:血清和脐带血都是常见的外泌体样本来源。由于血液在高压过程中会受到剧烈

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