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- 经科
- JK-367
- 国产
- 2025年12月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存：
现货
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50ul
产品简介
BCECF AM是一种可以穿透细胞膜检测细胞内pH的荧光染料。BCECF AM没有荧光，进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF，从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同，最大激发波长在503nm左右，最大发射波长在520nm左右，实际检测时推荐使用的激发波长为488nm，发射波长为535nm。
BCECF AM不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究，也有报道用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的细胞内pH水平检测。在有细胞内pH变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中BCECF AM被广泛应用。
用于细胞内pH检测时，常用的BCECF AM的浓度为1~10μM。
产品信息
CAS：117464-70-7
中文名：2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素乙酰甲酯
英文名：2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein, acetoxymethyl ester
分子式：C39H36O19
分子量：808.69
纯度：≥90%
外观：白色粉末
使用方法（以人中性粒细胞为例，仅供参考）
1．用HEPES制备细胞悬液，细胞浓度为4×107个/mL
2．将5mM的BCECF AM/DMSO溶液加入细胞悬液中，使BCECF AM终浓度为3µM。
3．在37℃培养细胞30分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。
4．用HEPES缓冲液清洗细胞3次，制成3×106个/mL的细胞悬液。
5．使用荧光显微镜或带有图像分析系统的激光共聚显微镜检测细胞的荧光强度。
保存条件
-20℃避光保存，有效期一年。
注意事项
1、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2、标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。
3、BCECF AM可能对人体有害，请注意适当防护。
4、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验棕色小玻璃瓶，标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
（一）BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液，等份分装后，－20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS（含Ca2+、Mg2+）洗2遍。加入BCECF-AM（终浓度1～5μmol/L），37℃孵育30～60min。PBS（含Ca2+、Mg2+）洗2遍。激光扫描共聚焦显微镜观察。 （二）SNARF-1定量比率测定pH值 1． 储存液配制 SNARF溶于DMSO配成1mmol/L溶液，等份分装后，－20℃避光
体的pH则在4.5～6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、SNAFL-calcein)、BCECF等，这些探针均为疏水性探针，须使用其AM形式。FITC-dextran则适用于pH范围4～6之间，如溶酶体pH的检测，该探针也不能透过质膜，但可通过细胞胞饮作用进入溶酶体，因此应选择分子量稍小的Dextran(葡聚糖)。 5． 细胞
将各光学切片的数据组合成一个真实的三维图像，并可从任意角度观察，也可以借助改变照明角度来突出其特征，产生更生动逼真的三维效果。 4. 动态荧光测定 Ca2+、pH 及其它细胞内离子测定，利用ACAS能迅速对样品的点，线或二维图像扫描，测量单次、多次单色、双发射和三发射光比率，使用诸如Indo-1、BCECF 、Fluo-3等多种荧光探针对各种离子作定量分析。可以直接得到大分子的扩散速率，能定量测定细胞溶液中Ca2+对肿瘤启动因子、生长因子及各种激素等刺激的反应，以及使用双荧光探针Fluo
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