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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
江蓝纯
- 规格:
50微升
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| S1006 | BCECF AM (pH荧光探针, 5mM) | 50微升 | 430.00元 |
BCECF AM,即2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein,acetoxymethyl ester,是常用的检测细胞内pH的荧光探针。
本BCECF AM(pH荧光探针)是配制于无水DMSO(anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为5mM。
BCECF AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。BCECF AM没有荧光,进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF,从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同,大激发波长大致在503nm左右,大发射波长大致在520nm左右,实际检测时推荐使用的激发波长为488nm,发射波长为535nm。
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文献和实验(一)BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(终浓度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。激光扫描共聚焦显微镜观察。 (二)SNARF-1定量比率测定pH值 1. 储存液配制 SNARF溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光
体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、SNAFL-calcein)、BCECF等,这些探针均为疏水性探针,须使用其AM形式。FITC-dextran则适用于pH范围4~6之间,如溶酶体pH的检测,该探针也不能透过质膜,但可通过细胞胞饮作用进入溶酶体,因此应选择分子量稍小的Dextran(葡聚糖)。 5. 细胞
将各光学切片的数据组合成一个真实的三维图像,并可从任意角度观察,也可以借助改变照明角度来突出其特征,产生更生动逼真的三维效果。 4. 动态荧光测定 Ca2+、pH 及其它细胞内离子测定,利用ACAS能迅速对样品的点,线或二维图像扫描,测量单次、多次单色、双发射和三发射光比率,使用诸如Indo-1、BCECF 、Fluo-3等多种荧光探针对各种离子作定量分析。可以直接得到大分子的扩散速率,能定量测定细胞溶液中Ca2+对肿瘤启动因子、生长因子及各种激素等刺激的反应,以及使用双荧光探针Fluo
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