高效mRNA转染试剂（10mg/ml）

产品简介

高效mRNA转染试剂（10mg/ml）是一种新型的阳离子脂质体转染试剂，可用于将mRNA高效地递送到真核细胞内。该转染试剂能够与蛋白或抗体形成带正电荷的非共价复合物，细胞膜表面带负电荷，能够将该复合体吸附，被吸附后的复合体能够通过膜的融合作用或者细胞内吞的方式形成包涵体进入细胞，并释放到细胞质中。具有低毒、高效的优点，适用于mRNA的体外转染。

使用方法（以24孔板单孔用量为例）

1、转染试剂工作液准备：计算所需用量，用NaAc缓冲液（25mM，pH5.2）将转染试剂母液稀释10倍至1µg/µl。

注意：为确保重复性良好，稀释后的工作液不建议重复使用。

2、分别取0.5、1、2或3µl转染试剂工作液，然后加入NaAc缓冲液稀释到20µl。（例如，0.5µl转染试剂工作液中加入19.5µl NaAc缓冲液进行稀释）。

3、用NaAc缓冲液将mRNA稀释至0.025µg/µl，然后将20µl mRNA加入到步骤2稀释的20µl转染试剂中，温和混匀，孵育10min，最后将40µl复合物与460µl Opti-MEM混合。（即24孔板中每孔含有500µl转染培养基）。

4、在孔内加入复合物之前，贴壁细胞必须用PBS至少洗涤一次，然后和复合物共同孵育24h。（8h后可以观察到转染的细胞）。

保存条件

-20ºC保存，有效期12个月。

注意事项

1、为了最佳转染效率，推荐实验当天细胞应达到70-80%的密度。

2、本转染试剂需在无血清、无双抗条件下进行转染，使用含血清的正常生长培养基进行细胞铺板后，在加入复合物前需洗涤并移去生长培养基。也可根据细胞种类于转染6小时后加入含血清培养基。

3、为了达到更好的转染效果，可根据实验需要优化mRNA与高效mRNA转染试剂（10mg/ml）的配比，推荐优化比例范围为1:1~1:8（w/w, mRNA:高效mRNA转染试剂）。例如：24孔板，mRNA终浓度为5µg/孔（0.5ml），根据细胞类型最佳试剂量可以为0.5、1、2、3或4µg/孔。

4、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。