组织线粒体/核分离试剂盒

如何做好 WB 方案设计？你需要了解这些信息

在 RIPA 不可溶组分中，如果样品又是研磨困难的组织样品，则优先选择对膜蛋白和小分子量蛋白提取效率更高且不需要匀浆仪的 Invent 柱式法工具进行总蛋白提取[1]。 * 目标蛋白在某个特定细胞器上（内质网，高尔基体，溶酶体，线粒体，内体等）表达，且蛋白表达量较低，若用总蛋白检测时条带较弱，则推荐使用 Invent 柱式法工具富集特定细胞器蛋白后再检测，提高检出效率。 * 研究蛋白定位或研究蛋白转运过程，推荐使用 Invent 柱式法工具进行细胞组分分离，将样品分离为不同组分如分成细胞核，细胞浆，细胞

膜蛋白转运研究

分离后通过免疫沉淀或免疫印迹检测细胞内特定蛋白质的移动。例如，对某个细胞系中某个对质膜蛋白转运有影响的特殊因子感兴趣，可以用这个因子处理细胞，处理后的细胞通过离心富集。然后将处理过的细胞和没有处理过的细胞分别分离成不同组分。许多传统方法和商业试剂盒可以将细胞/组织分离成亚细胞结构例如胞浆，质膜，细胞器和细胞核。通过使用特异性抗体免疫印迹对比目标膜蛋白的分布。这种研究方法的基本要求是分离出的亚细胞组份必须相对干净。在市场上有许多细胞组分分离试剂盒，但是通常都具有显著的交叉污染，所以仔细选择细胞组分分离试剂盒

如何对细胞组分进行分级分离

等渗的提取缓冲液(带或不带还原剂和蛋白酶抑制剂)来维持感兴趣的细胞器。有时也需要机械裂解或去污剂裂解。“各个不同供应商在细胞分级分离试剂盒的设计上都是一致的，而不同细胞组分的差异在于缓冲液组成、裂解试剂和离心速度，”Moehlenbrock说。 此类试剂盒的价值并不在于某些秘密试剂，而在于QC系统的一致性和重复性。“细胞分级分离的方法已经过充分鉴定，其操作步骤适用于大部分应用，”Moehlenbrock说。“商业化试剂盒为最终用户带来了简便和效率，同时提供了品质保证的安全