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-20℃
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大量
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上海机纯实业有限公司
- 规格:
50T
线粒体是细胞呼吸的主要场所,细胞活动所需的能量主要由在线粒体内进行的氧化所产生的能量来供应。制备线粒体的关键是保持线粒体的完整性和纯度,可通过分级分离法获得,即先低俗出去细胞核以及细胞碎片,再进行高速梯度离心分离线粒体。
自备材料:
低温离心机、匀浆器
PBS
注意事项:
试剂 (如PMSF)对于不同实验不必全部使用,在实验条件成熟后可以不必使用。
如果不是用于制备线粒体蛋白,Mitochondria Lysis buffer不必加入PMSF。如果用于制备线粒体蛋白样品,Mitochondria Lysis buffer需添加PMSF。PMSF一定要在试剂加入到样品中前1~2min内加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。
分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行,所用溶液需冰浴或4℃预冷,全部操作时间尽量控制在1h以内。
通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取1000g和12000g,如果希望纯度更高,但对线粒体的得率要求不高,前后两次离心速度可用2000g和6000g。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验sumu2006 我买了细胞线粒体分离试剂盒,想用于分离血小板线粒体。 查文献发现有专门的血小板线粒体分离试剂盒。 不想浪费之前的试剂盒,不知能否用于血小板,哪位高人可以指点下? 万分感谢! Fasta921 两种试剂盒方法比较一下。 再根据血小板小,无核等特点作出修改! dpw147 楼主你好,我想知道,你搞明白细胞的和血小板的线粒体分离试剂盒是否一样可用
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