胍基丁胺(AGM)ELISA科研(竞争法)

竞争法ELISA操作步骤

实验开始前，各试剂和样本均应平衡至室温；样本复融后需再次离心，取上清检测；试剂或样本配制时，需充分混匀并尽量避免起泡；标曲和样本建议做复孔检测。 加样：将标准品工作液依次加入到前两列孔中，每个浓度的工作液并列加两孔，每孔50 μL。待测样品加入到其他孔，每孔50 μL(若样本浓度高于检测范围，需用标准品&样本稀释液稀释后取样)。立即每孔加入配好的生物素化抗体工作液50 μL。混匀，给酶标板覆膜，37℃孵育45分钟。提示：加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，避免产生

ELISA夹心法和竞争法在Excel中拟和曲线

excel的公式拷贝功能，计算所有浓度。简化方法 如果有示例的excel表格，过程可参照附件的EXCEL表格，您的新数据可以这样拟和：双击图表，把它输入到图表的数据中，就可以拟和曲线。根据曲线方程序，更改公式的参数，计算出浓度。三、竞争法拟和曲线Logit-log 直线回归竞争法一般情况下用Logit-log 直线回归的方法可以拟和成近似一条直线；令 p = OD/OD0, q = 1 - p,y = ln (p / q), x = lg (浓度),其中: OD 为反应值,OD0 为浓度为 0 的反应

ELISA 原理与分类

于阴性反应。如抗原为高纯度的，可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质，直接包被不易成功，可采用捕获包被法，即先包被与固相抗原相应的抗体，然后加入抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，抗HBc ELISA一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此方法。 5.竞争法测抗原 小分子抗原或半抗原因缺乏