干眼症动物模型

一、干眼症动物模型的分类与构建方法

（一）按病理机制分类

1. 泪液缺乏型（Aqueous-deficient Dry Eye）

   • 手术干预法
     • 手术摘除泪腺、哈氏腺及第三眼睑（兔、大鼠常用），导致泪液分泌量减少 >50% 
     • 泪腺导管结扎术（犬、猫适用），模拟泪液排出障碍 
   • 药物抑制法
     • 抗胆碱能药物：0.1%a托品滴眼（兔，连续14天）或氢xiu酸东莨菪碱（SCOP）皮下注射（小鼠），竞争性抑制泪腺M受体 
     • 全身应用毒蕈碱受体阻滞剂（如氢xiu酸东莨菪碱透皮贴），降低泪液分泌 
   • 自身免疫诱导法
     • 注射泪腺抗原诱导自身免疫性泪腺炎（小鼠），模拟干燥综合征 

2. 蒸发过强型（Evaporative Dry Eye）

   • 睑板腺功能障碍（MGD）模型
     • 睑板腺开口烧灼术（兔）：50%三lv乙酸灼烧球结膜，破坏脂质分泌 
     • 机械性上提眼睑（大鼠），减少瞬目频率 
   • 环境诱导法
     • 低湿度环境：智能干燥系统（湿度<30%）持续暴露7-14天（小鼠） 
     • 蓝光照射（300lx，12h/d）诱发眼表氧化损伤 

3. 混合型（Mixed Mechanism）

   • 手术摘除泪腺+睑板腺烧灼（兔），同步减少泪液分泌与增加蒸发 
   • 去势手术（性腺摘除）降低性激素水平，影响泪腺及睑板腺功能（雄激素缺乏模型） 

4. 特殊病因模型

   • 代谢性疾病相关
     • 高脂饮食诱导（小鼠）：8周高脂喂养导致睑板腺脂质异常 
     • 糖尿病模型（链脲佐菌素诱导大鼠），伴随泪腺纤维化 
   • 药物毒性模型
     • 苯扎氯铵（BAK）滴眼：0.1%浓度连续7天，破坏角膜上皮屏障 
     • 10% N-乙酰半胱氨酸溶液局部应用，诱导粘蛋白缺乏 

二、模型建立的关键技术参数

注：泪液缺乏型模型以Schirmer I值<5mm/5min为成功标准；蒸发过强型以TBUT<10s为临界值 

三、模型评价体系

（一）功能学检测

1. 泪液分泌量：Schirmer I试验（滤纸浸湿长度）
2. 泪膜稳定性：泪膜破裂时间（TBUT）荧光素钠染色法 

（二）形态学与组织病理学

1. 角膜损伤评分：
   • 荧光素钠染色分级（0-12分）：点状着色=1分/象限，片状着色=2分/象限 
2. 杯状细胞计数：结膜印迹细胞学检查（密度<500 cells/mm²为异常） 
3. 炎症因子检测：
   • 结膜组织IL-6、TNF-α、ICAM-1表达↑（ELISA/qPCR） 
   • 泪液MMP-9、Lactoferrin水平异常 

（三）新型评估技术

• OCT血管成像：量化角膜缘血管网密度（干眼模型↑20-30%） 
• 共聚焦显微镜：活体观察杯状细胞萎缩及神经纤维密度↓