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- FUYUBIO
- 国产/进口
- FY-22FN1542
- 2025年12月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
KM933
- 库存：
现货库存
- 供应商：
上海富雨
- 肿瘤类型：
.
- 细胞类型：
KM933EB病毒转化的人B淋巴细胞
- 品系：
KM933EB病毒转化的人B淋巴细胞
- 组织来源：
B淋巴；EBV转化
- 相关疾病：
KM933EB病毒转化的人B淋巴细胞
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
KM933EB病毒转化的人B淋巴细胞
- 细胞形态：
KM933EB病毒转化的人B淋巴细胞
- 是否是肿瘤细胞：
.
- 器官来源：
B淋巴；EBV转化
- 运输方式：
复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
- 年限：
三代内
- 生长状态：
悬浮
- 规格：
1×106cells/T25培养瓶
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞运输： | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶） |
KM933EB 病毒转化的人B淋巴细胞 KM933EB 病毒转化的人B淋巴细胞 KM933EB 病毒转化的人B淋巴细胞
显微镜下部分细胞产品的形态： 
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single－cell transcriptome sequencing data
期刊：MODERN ONCOLOGY，Aug．2023，VOL. 31，No. 16
作者：HU Wu1，WEN Yiqiao2，QIN Jialan1，ZHAO Ying3，ZHANG Tianbiao1
DOI：10．3969 /j．issn．1672－4992．2023．16．003
1．血液制备：柠檬酸（Citric Acide）或肝素抗凝取血1～2ml，分装入管中，每管0.5ml全血，置于4℃冰箱中30分钟。 2．EBV病毒转化：从液氮中取出冻存的0.5ml全血，在37℃水中迅速解冻。 3．将解冻细胞与10ml不含血清的RPMI 1640混合，2500 rpm离心2分钟，弃上清，用含20％的胎牛血清、青、链霉素和庆大霉素的RPMI 1640生长培养基重悬细胞。 4．加入0.3～
细胞10万～30万。待细胞生长进入指数增生期时，向培养瓶中加入致癌剂MNNG。致癌剂量1～3微克/毫升营养液。在37℃温箱中培养12～48小时。 4．低血清培养：弃掉MNNG作用液，用温PBS洗1～3次，加入含20%小牛血清，继续置温箱中培养2～3周，然后改用含5%血清培养液培养。低血清培养液不利于正常细胞生长，但已转化的细胞仍能增殖和形成转化灶。 5．转化灶形成和分离：在成功情况下，用致癌物处理过的细胞于10天后在正常细胞之间，可产生数量不等的转化灶。 2）病毒转化细胞 1．血液制备
国家人类基因组北方研究中心 对外开展重组腺病毒构建包装服务 通过与美国Vector Biolab公司合作，国家人类基因组北方研究中心（北京诺赛基因组研究中心有限公司）利用优越的实验条件和训练有素的科研人员，成功构建的一个集克隆、包装、扩增、纯化为一体的重组腺病毒构建技术平台。从2005年7月成立腺病毒小组并开展实验至今，为课题组内部完成包装200多个腺病毒，为Vector Biolab公司成功包装近300个腺病毒，并且进入美国市场。 本系统是以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒
