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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
KMST-6
- 库存:
100
- 供应商:
上海富雨
- 肿瘤类型:
.
- 细胞类型:
详见说明
- 品系:
详见说明
- 组织来源:
胚成纤维细胞;女性
- 相关疾病:
详见说明
- 物种来源:
JCRB
- 免疫类型:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 是否是肿瘤细胞:
.
- 器官来源:
胚成纤维细胞;女性
- 运输方式:
常温或者干冰
- 年限:
详见说明
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞运输: | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |
显微镜下部分细胞产品的形态:

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文献和实验实验材料: 1. 肺组织:取自妊娠14—18周的胎儿; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 消化液:0.25%胰蛋白酶(pH7.6—7.8),0.02%EDTA溶液; 4. 培养液:DMEM或RPMI1640,加10%—20%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml; 5. 保存液:10%二甲亚砜或10%甘油; 6. 眼科剪、眼科镊等无菌消毒手术器械;
肾细胞CCC-HPF-1 人胚肺二倍体细胞(自建)CCC-ESF-1 人胚胎皮肤成纤维细胞(自建)HFF 人前皮肤成纤维细胞HFSF 人胚胎眼巩膜成纤维细胞HFTF 人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞HK-2 人肾小球上皮细胞HKC 人胚肾上皮细胞HSF 人皮肤成纤维细胞MRC-5 人胚肺成纤维细胞WISH 人羊膜细胞CCC-HEL-1 人胚胎肝正常细胞(自建)CCC-HEK-1 人胚胎肾正常细胞(自建)CCC-HHM-2 人胚胎心肌组织来源细胞(自建)CCC-HPE-2 人胚
选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考:(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。(2)其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。(3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。细胞系细胞类型种组 织培养基293成纤维细胞人胚









