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现货库存
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上海富雨生物
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- 物种来源:
人或动物
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- 细胞形态:
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- 是否是肿瘤细胞:
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- 器官来源:
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- 运输方式:
常温或干冰
- 年限:
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- 生长状态:
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- 规格:
1×10^6cells/T25
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种属 |
人 |
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别称 |
DU-145+Docetaxel |
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组织来源 |
前列腺 |
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疾病 |
前列腺癌 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代,消化2-3分钟。 |
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完全培养基配置 |
RPMI1640培养基;10%胎牛血清;Docetaxel 30 nM ;1%双抗 |
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简介 |
DU145是从一位有3年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者的脑部转移灶中建立的。该细胞系未检测到激素敏感性 ,酸 性磷酸酶阳性 ,单个的细胞可在软琼脂中形成集落。对此细胞和原始肿瘤的亚显微结构分析可见微绒毛、微丝、细胞 桥粒、线粒体、发达的高尔基体和异质溶酶体。该细胞不表达前列腺抗原。 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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STR |
Amelogenin:X ,Y;CSF1PO:10 ,11;D13S317:12 ,13 ,14;D16S539:11 ,13;D18S51 :12; D19S433:13;D21S11 :30 ,33;D2S1338:16;D3S1358:16;D5S818:10 ,13;D7S820:7 ,10, 11;D8S1179:13 ,14;FGA:21 ,22;TH01:7;TPOX:11;vWA:17 ,18 ,19; |
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倍增时间 |
每周 2-3次 |
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培养条件 |
气相:空气 ,95% ;二氧化碳 ,5%。 温度:37摄氏度 ,培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液:90%FBS ,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液 |
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备注 |
收到细胞后按照下面的要求操作:培养瓶里面的培养液是不含药物的。待细胞长到40-50%的汇合度时 ,去掉培养 液 ,加入含10 nM Docetaxel药物的培养液 ,放入培养箱 ,这段时间肯定会有小部分细胞悬浮起来 ,但是不要紧 ,通 过换液可以去掉 ,下面的细胞待长满就可以消化传瓶了 ,一两代之后可以将药物浓度提高到30 nM,含药培养液用于 细胞培养都没问题的 ,冻存的时候就不要在冻存液里面加药物了。(注明:用不含药物培养基培养一周到两周 ,再用 含药培养基培养。)如需进行实验 ,请提前至少1周更换为正常培养基培养。 |
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产品使用 |
仅限于科学研究 ,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
常温细胞收货当天处理方式 1.收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。 2. 镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象, 方便后续 售后处理。 3. 消毒后,更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集 重新接种止培养瓶。 4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定), 首次传代推荐比例 1:2 到 1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定 可联系技术支持);若细 胞密度不到 80%则可继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收 集细胞。 5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代 (参考附件),或及时联系技术支持进行指导传代。 贴壁细胞传代:1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃; 2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次 3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的胰酶;胰酶量应足以覆盖细胞层 (T25为1ml); 4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异); 5.在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间延长几分钟,每 30 秒 钟检查一次解离情况; 6.细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍 体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散; 7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中,以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟 (请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异); 8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适 量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放 入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶 盖)。 悬浮细胞传代:将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min,收集上清,加 1- 2ml 完全培养基重悬,按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中,补充5-216ml/瓶新的完全培养基 , 最后放入细胞培养箱中培养。
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data 期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16 作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1 DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
受体细胞株(B类)DU145 人前列腺癌细胞G-401 人肾癌WilmsGLC-82 人肺腺癌细胞GT1.1 人垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素)HCT116 人结直肠癌HCT-8 人结肠腺癌HEC-1B 人子宫内膜癌细胞Hela 人宫颈癌细胞Hep G2 人肝癌细胞Hep-2 人喉癌细胞HL-60 人白血病细胞HOS 人骨肉瘤细胞HT-1080 人纤维肉瘤HT-29 人结肠腺癌细胞HuTu-80 人十二脂肠腺癌JEG-3 人绒癌细胞JEG-3/VP16 人绒癌
miR-370的高表达通过下调转录因子FOXO1的表达诱导前列腺癌细胞增殖
,它作为一种肿瘤抑制因子与各种关键的细胞功能有关,包括细胞生长、细胞的分化、细胞凋亡以及血管生成。所以,令人迷惑的是FOXO蛋白为何在肿瘤细胞中低表达。microRNA是一种非编码的含有20~22个核苷酸的单链RNA,它可以使靶基因的转录受到抑制,沉默或降解靶基因,对调控基因的表达起到极大的作用。最近的研究发现,在5种前列腺癌细胞系中miR-370比正常的前列腺上皮细胞显著高表达。miR-370的异常表达诱导前列腺癌细胞DU145和LNCaP的增殖,并促进细胞的非依赖型锚定增长和细胞克隆的形成;相反抑制
一、材料 1. Resazurin细胞活力检测试剂盒(Biotium,Inc.30025) 2. 细胞:在本试验中,使用了三种人类前列腺癌细胞系进行检测。 (1)DU145(ATCC,HTB-81)(2)PC3(ATCC,CRL-1435)(3)LNCap(ATCC,CRL-1740)二、仪器 1. SpectraPLUS酶标仪三、步骤 1. 标准曲线制备: (1)在96孔板中加入100 μL 培养基,然后接种适量细胞,贴壁细胞控制在40~10 000/孔
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