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人前列腺癌多西他赛耐药株DU-145+Docetaxel

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  • 上海富雨生物
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  • FY-25JY209
  • 2026年04月24日
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      上海富雨生物

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      /

    • 运输方式

      常温或干冰

    • 年限

      /

    • 生长状态

      /

    • 规格

      1×10^6cells/T25

    种属

    别称

    DU-145+Docetaxel

    组织来源

    前列腺

    疾病

    前列腺癌

    传代比例/细胞消化

    1:2传代,消化2-3分钟。

    完全培养基配置

    RPMI1640培养基;10%胎牛血清;Docetaxel 30 nM  ;1%双抗

    简介

    DU145是从一位有3年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者的脑部转移灶中建立的。该细胞系未检测到激素敏感性 ,酸 性磷酸酶阳性 ,单个的细胞可在软琼脂中形成集落。对此细胞和原始肿瘤的亚显微结构分析可见微绒毛、微丝、细胞 桥粒、线粒体、发达的高尔基体和异质溶酶体。该细胞不表达前列腺抗原。

    形态

    上皮细胞样

    生长特征

    贴壁生长

    STR

    Amelogenin:X Y;CSF1PO:10 11;D13S317:12 13 14;D16S539:11 13;D18S51 12;

    D19S433:13;D21S11 30 33;D2S1338:16;D3S1358:16;D5S81810 13;D7S820:7 10, 11;D8S1179:13 14;FGA:21 22;TH01:7;TPOX:11;vWA:17 18 19;

    倍增时间

    每周 2-3次

    培养条件

    气相:空气 95% ;二氧化碳 5%。 温度:37摄氏 ,培养箱湿度为70%-80%。

    冻存条件

    冻存液:90%FBS DMSO 10%,

    或使用非程序冻存液 

    备注

    收到细胞后按照下面的要求操作:培养瓶里面的培养液是不含药物的。待细胞长到40-50%的汇合度时 ,去掉培养

     ,加入含10 nM Docetaxel药物的培养液 ,放入培养箱 ,这段时间肯定会有小部分细胞悬浮起来 ,但是不要紧 ,通 过换液可以去掉 ,下面的细胞待长满就可以消化传瓶了 ,一两代之后可以将药物浓度提高到30 nM,含药培养液用于  细胞培养都没问题的 ,冻存的时候就不要在冻存液里面加药物了。(注明:用不含药物培养基培养一周到两周 ,再用   含药培养基培养。)如需进行实验 ,请提前至少1周更换为正常培养基培养。

    产品使用

    仅限于科学研究 ,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

    常温细胞收货当天处理方式 1.收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。 2. 镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象, 方便后续 售后处理。 3. 消毒后,更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集 重新接种止培养瓶。 4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定), 首次传代推荐比例 1:2 到 1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定 可联系技术支持);若细 胞密度不到 80%则可继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收 集细胞。 5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代 (参考附件),或及时联系技术支持进行指导传代。 贴壁细胞传代:1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃; 2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次 3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的胰酶;胰酶量应足以覆盖细胞层 (T25为1ml); 4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异); 5.在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间延长几分钟,每 30 秒 钟检查一次解离情况; 6.细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍 体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散; 7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中,以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟 (请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异); 8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适 量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放 入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶 盖)。 悬浮细胞传代:将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min,收集上清,加 1- 2ml 完全培养基重悬,按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中,补充5-216ml/瓶新的完全培养基 , 最后放入细胞培养箱中培养。

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