稳定细胞系构建服务

 

稳定细胞系构建服务

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在现代生物医药与生物技术领域中，稳定细胞系的构建已成为基础研究、重组蛋白表达、抗体药物开发及基因功能研究中不可或缺的一环。作为一家专注于细胞工程与分子生物学服务的高新技术企业，辰辉创聚生物凭借成熟的技术平台和丰富经验，为客户提供一站式的细胞系构建与表达系统定制服务，助力科研与产业转化。

 

▎服务介绍

稳定细胞系（Stable Cell Line）：是指将外源基因通过转染或基因编辑的方式稳定整合到宿主细胞基因组中，使其在无筛选压力下长期表达目的蛋白。这类基因整合细胞系相比瞬时转染系统，在表达一致性、蛋白产量及工艺放大方面表现更优，尤其适合下列应用：

蛋白表达细胞系：（如CHO、293系统）用于抗体、酶、疫苗等蛋白大规模制备

CRISPR细胞系： 实现基因敲入/敲除，便于机制研究

药物筛选细胞系： 用于高通量筛选与功能验证

HEK293稳定表达系统： 在病毒包装及瞬转验证方面应用广泛

 

▎技术优势

我们整合了先进的分子克隆、细胞转染、筛选及表达检测平台，构建高效灵活的细胞株开发服务体系。

✔ 多种宿主细胞可选

CHO细胞系构建（CHO-K1 / CHO-S）：重组蛋白与抗体表达优选；HEK293 / 293T：适合病毒包装、蛋白验证、瞬转模型；SP2/0、BHK21、NS0、Sf9 等宿主亦可按需开发

✔ 表达系统定制与转染策略

采用脂质体、电转、病毒介导或PiggyBac系统实现转染稳定细胞株构建；支持CRISPR细胞系定制，进行靶向基因敲入或上调；可根据表达需求定制启动子（CMV、EF1α、CAG等）与筛选标记（如G418、Puro）

✔ 高效筛选与单克隆建立

使用有限稀释、ClonePix 2等技术筛选单克隆细胞株；按照表达水平选择高表达细胞株构建候选株；验证包括qPCR、WB、ELISA、FACS等多手段

 

▎服务流程

我们为客户提供标准化、可追溯的稳定细胞系构建流程：

✔  需求分析与方案设计：分析目标蛋白/基因表达需求，制定定制细胞系构建方案

✔  载体设计与构建：依据表达系统，构建表达载体（含标签、筛选基因等）

✔  转染与筛选：转染至宿主细胞，进行药物抗性筛选（G418、Puro等）；初步筛选表达阳性细胞群体

✔  单克隆挑选与表达验证：筛选并扩增表达稳定的单克隆细胞株；测试其表达量、稳定性、传代一致性等

✔  细胞冻存与交付：提供完整交付材料：细胞冻存管、培养方法、表达验证报告等

 

▎服务优势

✔ 周期短：最快 6 周完成表达验证

✔ 表达量高：优化载体与筛选策略，实现>50 pg/cell/day

✔ 稳定性好：验证可稳定表达 15-20 代以上

✔ 平台通用性强：支持CHO、HEK293等多系统

 

▎应用案例

✔  科研合作 | 某大学生命科学研究院

项目目标： 构建稳定表达报告基因的HEK293细胞株，用于信号通路功能研究。
技术方案： 慢病毒转导，Puro抗性筛选，定制双报告载体。
交付成果： 3株高表达克隆，表达验证报告，细胞冻存管。

✔  企业合作 | 某生物技术公司

项目目标： 构建高表达CHO稳定细胞系，用于重组蛋白表达和工艺开发。
技术方案： CHO-S细胞，双抗性筛选，自动化单克隆筛选。
交付成果： 高表达细胞株（>1.8g/L），表达稳定性验证，培养方案。

✔  研究项目 | 某科研机构

项目目标： 构建目标蛋白稳定表达293T细胞株，用于蛋白功能研究。
技术方案： PiggyBac转座子系统，单克隆筛选及表达检测。
交付成果： 稳定表达克隆株，qPCR及Western blot验证，细胞冻存管。