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- 2026年01月12日
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伊莱博生物科技（上海）有限公司
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RNA干扰
一、定义与核心机制
RNA干扰（RNA interference, RNAi）是一种由双链RNA（dsRNA）介导的转录后基因沉默现象，通过特异性降解目标mRNA实现基因表达调控。其核心机制分为以下步骤：
- dsRNA切割
Dicer酶将长dsRNA或前体miRNA切割为21-23nt的小干扰RNA（siRNA），每条siRNA 3'端有2-3个突出碱基。 - RISC复合物形成
siRNA双链解旋后，反义链（引导链）与Argonaute蛋白结合形成RNA诱导沉默复合物（RISC）。 - 靶标识别与降解
RISC通过碱基配对定位同源mRNA，在距离siRNA 3'端12个碱基处切割mRNA，导致其降解。
二、RNAi类型对比
| 特征 | siRNA | miRNA |
|---|---|---|
| 来源 | 外源dsRNA（病毒、人工合成） | 内源pri-mRNA加工 |
| 长度 | 21-23bp | 21-25nt |
| 互补性 | 完全互补 | 不完全互补（3'UTR结合） |
| 作用机制 | 切割mRNA | 抑制翻译或降解mRNA |
| 稳定性 | 低（易降解） | 高 |
| 脱靶率 | 较高 | 较低 |
| 导入方式 | 化学合成、转染 | 表达载体、病毒导入 |
三、核心应用领域
1. 基因功能研究
- 高通量筛选：利用RNAi文库系统性沉默基因，解析基因网络。
- 信号通路解析：通过抑制特定基因观察下游效应，如MAPK通路研究。
2. 疾病治疗
- 癌症治疗：靶向KRAS、BRAF等癌基因，抑制肿瘤增殖（临床试验阶段）。
- 抗病毒疗法：抑制HBV、HCV病毒基因表达（如丙型肝炎病毒核心蛋白抑制研究）。
3. 农业应用
- 抗病虫害作物：通过沉默害虫关键基因（如Bt棉）提高抗性。
- 性状改良：调控植物激素合成基因，延长果实保鲜期。
4. 药物开发
- 靶点验证：快速验证新药靶标有效性，如阿尔茨海默病相关基因筛选。
- RNA药物：Onpattro（siRNA药物）获批治疗转甲状腺素蛋白淀粉样变性
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文献和实验RNA干扰 RNA干扰（RNA interference，缩写为RNAi）是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象，其机制是通过阻碍特定基因的翻译或转录来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA时，该mRNA发生降解而导致基因表达沉默。RNAi在基因沉默(silent gene)方面具有高效性和简单性，所以是基因功能研究的重要工具。 siRNA是一类长约21～25 个核苷酸的双链小RNA分子，可作为一种特殊引物,在RNA 依赖RNA聚合
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