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文献和实验【专题讨论】杆状病毒——昆虫细胞蛋白表达系统,影响蛋白表达的因素?
-6及阳性对照Bacmid/CAT,已构建成功。 2. 昆虫细胞Sf9、High Five及其相关培养基、转染试剂均购自Invitrogen公司。抗His单克隆抗体购自Oncogene公司,CAT-ELISA试剂盒购自 Roche。 实验步骤: 一、 昆虫细胞转染: 1. Sf9细胞计数,取6孔板中的两孔,每孔加入9×10 5个细胞(其中一孔设为正常对照),并以全培培养至少1小时,使细胞贴壁。 2. 准备重组质粒和细胞转染试剂的混合物: a. 溶解1μg纯化重组杆状
酸草酰乙酸转氨酶(谷草转氨酶 GOT,现又称门冬氨酸氨基移换酶 AST)。这两种酶存于体内许多组织。 GPT以肝含量最多, GOT则肝含量次于心。当肝组织损伤时,细胞内酶释放入血流,使血清酶活性升高,升高程度与肝细胞损伤程度相关。在肝病检查中,使用 GPT更多。参考值根据所用试验方法各不相同,金氏法 20~ 118单位 /dl、赖氏法 2~ 40单位 /dl、酶法< 30IU/L。 GPT过高,可见于各种原因引起的肝炎、肝硬变、肝癌、脂肪肝、胆道疾患等。此外,心肌损害、肌肉损害等许多情况也可升高
要的两种,前者俗称为谷丙转氨酶(GPT),后者为谷草转氨酶(GOT)。 (二)体内分布 AST广泛存在于多种器官中,按含量多少顺序为心、肝、骨骼肌和肾等,肝中70%存在于肝细胞线粒体中。AST有两种同工酶ASTs 和ASTm,分别存在于可溶性的细胞质和线粒体。细胞轻度损伤时ASTs 升高显著,而严重损伤时,则ASTm大量出现于血清检验地 带网中。正常血清所含AST的同工酶主要为ASTs,但在病理状态下,如细胞坏死,则血清中以ASTm为主。 ALT大量存在于肝脏组织中,其次为肾、心、骨骼
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