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100+
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上海维亦特生物
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48T/96T
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文献和实验ziweihua 求助高人啊,我想用斑马鱼整体胚胎检测其细胞凋亡情况,选用的Roche的in situ cell death detection kit, POD. 按照其中的贴壁细胞或细胞涂片的方法做了两遍,可是连阳性对照都没有信号。后来查找到一篇论文中的方法,如下: a,收集胚胎后用PBS清洗,转移到1.5ml的EP管内,4%多聚甲醛PBS固定过 夜 b,用PBS配制 25%50%75%的梯度酒精,每次5min将胚胎梯度脱水。
一、原理AsA-POD催化AsA与H2O2反应,使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸(MDAsA)。随着AsA被氧化,溶液中290nm波长下的消光值(A290)下降,根据单位时间内A290减少值,计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8(mmol/L)/cm计算,酶活性可用每克鲜重每小时氧化AsA的微摩尔数μMol/g·H表示。二、仪器离心机;紫外分光光度计;研钵;试管。三、试剂50mmol/L K2PO4-KH2PO4缓冲液(PH7.0,内含0.1mmol/L EDTA-Na2)
实验原理 AsA-POD催化AsA与H2O2反应,使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸(MDAsA)。随着AsA被氧化,溶液中290nm波长下的消光度值(A290)下降,根据单位时间内A290减少值,计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8(mmol/L)/cm计算,酶活性可用μmolAsA/(g FW•h)表示。 实验试剂 50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液(pH7.0,内含0.1mmol/L
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