植物液泡膜H+-焦磷酸酶(V-H+-PPase)ELISA科

非损伤微测技术测定液泡H+流速的方法

增加，但是TS15的H + 外流要显著强于WT的外流，说明在转基因植株中NHX1具有更高的活性。在200mM NaCl条件下施加ATP和PPi，液泡△H + 流速的变化反映H-ATPase和PPase的活性大小；研究表明，在施加ATP后，转基因烟草液泡表现出更大的△H + 流速；该结果说明转基因植株比WT植株在200mM NaCl条件具有更高的V-ATPase活性。同时，用传统方法计算H-ATPase和PPase酶活结果也证实了NMT测定的准确性。与传统荧光方法相比，NMT从操作的流程，结果精度

操作篇：western blot 之 转膜

转膜篇 1. 转一张膜需准备 6 张 7.0～8.3 cm 的滤纸和 1 张 7.3～8.6 cm 的硝酸纤维素膜。切滤纸和膜时一定要戴手套，因为手上的蛋白会污染膜。将切好的硝酸纤维素膜置于水上浸 2 h 才可使用。 要领： （1）用镊子捏住膜的一边轻轻置于有超纯水的平皿里，要使膜浮于水上，只有下层才与水接触。这样由于毛细管作用可使整个膜浸湿。若膜沉入水里，膜与水之间形成一层空气膜，这样会阻止膜吸水； （2）个人感觉其实转膜之前浸湿一下就 ok 了，没有

光合作用基础知识讲座系列四：电子传递和光合磷酸化

（4-31）中5.7ΔpH(kJ·mol-1)为膜内外质子浓度差所具有的能量，而96.5ΔE(kJ·mol-1)为膜电势所具有的能量。 将式4-31两边用F(96.5kJ·mol-1·V-1)除，规定△μH+/F为质子动力，其单位为电势(V)。 在25℃时：pmf＝0.059ΔpH+ΔE 叶绿体类囊体膜的质子动力大部分是来自ΔpH部分，电荷分布所产生的ΔE的贡献很小，原因是其它离子，如Cl-、K+或Mg2+也能穿透类囊体膜，当H+穿透类囊体膜时，Cl-可以与H+同向穿透，或Mg2+ 与H+(1Mg