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上海维亦特生物
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文献和实验网络 抗幽门螺杆菌尿素酶抗体诊断 试剂 盒的研制与临床应用 本研究旨在制备纯化的标准化、商品化抗Hp尿素酶抗体试剂盒,供临床ELISA检测用。 1 材料与方法 1.1 试剂盒的制备 Hp尿素酶抗原的分离纯化研制:①经尿素酶试验选择尿素酶活性高的经系统鉴定的Hp菌株接种于含6%脱纤维绵羊
目前动物用单抗,在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用,大多以诊断试剂(盒)的形式提供,其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。一、酶标记1、辣根过氧化物酶(HRP)标记辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基用过碘酸钠氧化成醛基,加入抗体IgG后该醛基与IgG氨基结合,形成Schiff氏碱。为了防止HRP中糖的醛基与其自身蛋白氨基发生偶合,在用过碘酸钠氧化前先用二硝基氟苯阻断氨基。氧化反应末了,用硼氢
酶活性和抗体活性的测定可应用ELISA法、免疫 扩散、DAB-H2O2显色反应测定酶结合物的酶活性,抗体活性及效价、特异性。 (8)HRP抗体结合物的保存:加入等量甘油后,小量分装-20℃存放,防止反复冻融;或加入等量60%甘油4℃保存;不宜加NaN3或酚防腐,否则会影响酶活性。必要时冻干保存,以BSA或脱脂牛奶作保护剂。 程序二: (1)将5mg HRP 溶于0.3mol/L PH8.1 NaHCO3溶液中,加入1%二硝基氟苯无水乙醇溶液0.1ml
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