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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Amplite® Human Serum Albumin (HSA) Site II Binding Assay Kit
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格：
200Tests
| Ex (nm) | 337 | Em (nm) | 495 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
人血清白蛋白（HSA）是人血浆中酸性药物的重要载体之一，并且已表现出可逆地结合大量不同的化合物。已为HSA确定了几个不同的配体结合位点。其中，Site II被确定为主要的药物结合位点之一。Amplite™人血清白蛋白（HSA）Site II结合测定试剂盒是一种基于荧光的高通量测定法，用于确定小分子与HSA的结合。该测定法基于新型荧光探针HSA Blue™S2。它的特征是具有独特的光谱和结合特性，可结合至HSA的位点2。HSA Blue™S2在蛋白质结合状态和蛋白质未结合状态之间显示出较大的荧光强度差异。在HSA Blue™S2存在下，小分子竞争结合HSA导致荧光强度低。该测定法可用作高通量筛选工具，以确定在II位点与HSA的总结合。
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样品分析方案
概述
向孔中添加HSA工作溶液（50 µL）和HSA Blue™S2工作溶液（50 µL）
向各个孔中添加各种浓度的测试药物（50 µL）
在室温下孵育15至45分钟
使用荧光酶标仪在Ex / Em = 365/480 nm（截止= 435 nm）下测量响应
储备溶液配制
注意：将未使用的HSA Blue™S2储备溶液分装成一小份保存在-20°C下，以避免冻融循环。
工作溶液配制
注意：HSA Blue™S2工作溶液不应储存，应立即使用。
注意：5 mL HSA Blue™S2工作溶液足以用于一块96孔板。
注意：5 mL HSA工作溶液足以用于一个96孔板。
注意：对于此处提到的方案，一孔的建议体积为50 µL。
操作步骤
以下协议可用作指导，应根据需要进行优化。
- 在孔中加入50 µL HSA Blue™S2工作溶液。
- 在孔中加入50 µL HSA工作溶液。
- 在各自的孔中加入50 µL药物工作溶液。（总体积= 150 µL /孔）。
- 将样品在室温下孵育30分钟。
- 使用荧光酶标仪在Ex / Em = 365/480 nm（截止= 435 nm）处检测荧光的增加。
图示
图1.使用Amplite™人血清白蛋白（HSA）Site II结合测定试剂盒测量了华法林（Site-1药物）和布洛芬（Site-2药物）的反应。使用Spectra Max Gemini XS（分子设备）以Ex / Em = 365/480 nm和截止= 435 nm检测荧光。
参考文献
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文献和实验大鼠尿微量白蛋白 (ALB) 酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 本试剂盒仅供体外研究使用 ! 预期应用 ELISA 法定量测定大鼠尿液或其它相关生物液体中 ALB 含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗 ALB 抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗 ALB 抗体、 HRP 标记的 亲和素 ，经过彻底洗涤后用底物 TMB 显色
，分子量 272.4 。主要由卵巢卵泡 Graffian 和胎盘分泌，肾上腺少量分泌。血液中 98%雌二醇 (E2) 主要与性激素结合球蛋白 (SHBG) 结合，以及少量的血清蛋白，如白蛋白。极少一部分成为游离激素。在靶器官，雌二醇受体联合体影响雌激素活性 . 这些器官包括卵泡、子宫、乳房、阴道、尿道、丘脑下部、垂体和肝脏，皮肤也有少量。 应用 本酶联免疫吸附测定试剂盒运用竞争抑制酶标免疫分析法定量测定牛奶中 E2 含量。试剂盒中包含 96 次检测所需的酶联免疫试验试剂，包括标准
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
的特异性产生是由于抗原决定簇决定，抗体产生的过程也比较复杂，特别是小分子抗原必须偶联到载体蛋白上才能产生抗体。 ELISA测定结果的表现形式: 物质浓度：单位主要是μg/mL。 二、从微观角度来看 某一物质的抗原决定簇的活性位点(或者抗原抗体特异性结合位点)，与化学反应的活性位点可能存在差异。 三、总的来看 针对同一指标，生化试剂盒和ELISA试剂盒的检测结果趋势是正相关、负相关还是不相关的问题，需要更高技术设备和方法，以及大量的实验数据来验证。从原理中也说明了ELISA试剂盒分种属，而生化试剂盒
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