- ￥3466
- AAT Bioquest
- 进口
- 22801
- 2025年07月15日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Cell Meter™ JC-10 Mitochondrion Membrane Potential Assay Kit *Optimized for Flow Cytometry Assays*
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格：
100Tests
| Ex (nm) | 508 | Em (nm) | 524 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞仪检测 是美国AAT Bioquest研发的用于检测线粒体膜电位的试剂盒，JC-1在许多实验室中被广泛使用，但其水溶性差导致大的不便。即使在1μM浓度下，JC-1也倾向于在水性缓冲液中沉淀。当需要高染料浓度时，JC-10被开发成为JC的优异替代品。与JC-1相比，JC-10具有更好的水溶性。 JC-10能够选择性地进入线粒体，并随着膜电位的增加可逆地将其颜色从绿色变为橙色。该性质是由于膜极化时JC-10聚集体的可逆形成导致发射光从520nm（即JC-10单体形式的发射）向570nm（即J-聚集体形式的发射）的移动。当在490nm处激发时，随着线粒体膜变得更加极化，JC-10的颜色从绿色橙色可逆地变为绿色橙色。使用通常安装在所有流式细胞仪中的过滤器可以检测两种颜色。可以在荧光通道1（FL1）中分析绿色发射，在通道2（FL2）中分析绿色橙色发射。除了用于流式细胞仪外，它还可用于荧光成像和荧光微孔板平台。这种Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒使研究人员能够以酶标仪的形式运行JC-10检测，并为监测线粒体膜电位变化提供了强大的检测方法。
这种Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒使研究人员能够以酶标仪的形式运行JC-10检测，并为监测线粒体膜电位变化提供了可靠的检测方法。该试剂盒基于阳离子亲脂性JC-10染料检测细胞中线粒体膜电位的变化。在正常细胞中，JC-10浓缩在线粒体基质中，在那里形成红色荧光聚集体。然而，在凋亡和坏死细胞中，JC-10扩散出线粒体。它变成单体形式并以绿色荧光染色细胞。该试剂盒可用于筛选凋亡抑制剂。可以以方便的96孔和384孔荧光微量滴定板形式进行测定。是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供优质的线粒体膜电位荧光探针。
点击查看光谱
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 nm |
| Em： | 530/30 nm、575/26 nm |
| 通道: | FITC、PE通道 |
96孔板样品分析
概述
用密度为5×105到1×106个细胞/ mL的测试化合物制备细胞
用500μL1XJC-10染料加载溶液重悬细胞（2-5×105细胞/管）
37°C孵育/ 室温15-30分钟
用流式细胞仪分析FL1通道（绿色荧光单体信号）和FL2通道（橙色荧光聚合信号）
操作方法
1.准备细胞：
以5×105至1×106个细胞/ mL的密度制备细胞。
注意：应根据个体评估每个细胞系，以确定诱导细胞凋亡的细胞密度。
2.准备JC-10染料加载溶液：
2.1使用前在室温下清洗所有试剂盒中的试剂。
2.2将25μL的200X JC-10（组分A）加入5mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合。
注意：将未使用的200X JC-10（组分A）等分并保存在-20℃。 避免反复冻/融循环。
3.运行JC-10测定：
3.1用测试化合物细胞培养所需的一段时间以诱导细胞凋亡。设置并行控制实验。
对于阴性对照：仅用载体处理细胞。
对于阳性对照：在37℃，5％CO2培养箱中用2-10μM的FCCP或CCCP处理细胞15至30分钟。
注意：CCCP或FCCP可与JC-10染料加载溶液同时添加（来自步骤2.2）。可能需要滴定CCCP或FCCP以获得具有单个细胞系的结果。
3.2离心细胞，每管2-5×105个细胞。
注意：对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞摄入，用含有血清的培养基洗涤细胞一次，然后用JC-10染料加载溶液孵育（参见步骤3.3）。
3.3在500μLJC-10染料加载溶液中重悬细胞（来自步骤2.2）。
3.4在室温下或在37℃，5％CO2培养箱中孵育染料装载细胞15-60分钟，避光。
注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。
3.5通过在FL1通道中使用流式细胞仪检测荧光强度，获得绿色荧光单体信号（在凋亡细胞中），并使用FL2通道检测橙色荧光聚集信号（在健康细胞中）。建议使用FCCP或CCCP处理的细胞进行补偿校正（见附录）。
数据分析
1.在活的非凋亡细胞中，JC-10作为细胞溶质染色绿色中的单体存在，并且还在线粒体染成红色的聚集体中积累。 在凋亡细胞和死细胞中，JC-10仅以单体形式存在，染色细胞溶质绿。
2.使用FL2通道可检测到健康细胞中含有红色JC-10聚集体的线粒体。 通过使用FL1通道（FITC）可检测凋亡细胞中的绿色JC-10单体。
3. FL1与FL2的强度比用于监测化合物处理诱导的线粒体膜电位变化。
图1. FCCP诱导的JurKat细胞线粒体膜电位变化的影响。 将JurKat细胞染色载有JC-10染料加载溶液以及DMSO（Top）或5μMFCCP（低）10分钟。 使用FL1和FL2通道，用FACSCalibur（Becton Dickinson，San Jose，CA）流式细胞仪测量J-聚集体和单体形式JC-10的荧光强度。 将未补偿的数据（左栏）与补偿数据（右栏）进行比较。
参考文献
Anticancer properties of a new non-oxido vanadium (IV) complex with a catechol-modified 3, 3′-diindolylmethane ligand
Authors: Katja Dankhoff, Aamir Ahmad, Birgit Weber, Bernhard Biersack, Rainer Schobert
Journal: Journal of Inorganic Biochemistry (2019)
BDE-47 decreases progesterone levels in BeWo cells by interfering with mitochondrial functions and genes related to cholesterol transport
Authors: Anqi Shan, Mengxue Li, Xuejun Li, Yaoyan Li, Mengfan Yan, Ping Xian, Ying Chang, Xi Chen, Nai-jun Tang
Journal: Chemical Research in Toxicology (2019)
Enhancing magnetic resonance/photoluminescence imaging-guided photodynamic therapy by multiple pathways
Authors: Pei Liu, Jinghua Ren, Yuxuan Xiong, Zhe Yang, Wei Zhu, Qianyuan He, Zushun Xu, Wenshan He, Jing Wang
Journal: Biomaterials (2019)
5-Fluorouracil inhibits neural differentiation via Mfn1/2 reduction in human induced pluripotent stem cells
Authors: Shigeru Yamada, Daiju Yamazaki, Yasunari Kanda
Journal: The Journal of Toxicological Sciences (2018): 727--734
Determination of Hepatotoxicity in iPSC-Derived Hepatocytes by Multiplexed High Content Assays
Authors: Oksana Sirenko, Evan F Cromwell
Journal: (2018): 339--354
Yap1 safeguards mouse embryonic stem cells from excessive apoptosis during differentiation
Authors: Lucy LeBlanc, Bum-Kyu Lee, C Yu Andy, Mijeong Kim, Aparna V Kambhampati, Shannon M Dupont, Davide Seruggia, Byoung U Ryu, Stuart H Orkin, Jonghwan Kim
Journal: eLife (2018): e40167
Boosted Membrane Potential as Bioenergetic Response to Anoxia in Dinoroseobacter shibae
Authors: Christian Kirchhoff, Heribert Cypionka
Journal: Frontiers in Microbiology (2017): 695
Evaluation of anticancer properties of a new α-methylene-δ-lactone DL-249 on two cancer cell lines
Authors: Dorota K Pomorska, Katarzyna Gach-Janczak, Rafal Jakubowski, Tomasz Janecki, Jacek Szymański, Anna Janecka
Journal: Open Life Sciences (2017): 178--189
In vitro cardiotoxicity assessment of environmental chemicals using an organotypic human induced pluripotent stem cell-derived model
Authors: Oksana Sirenko, Fabian A Grimm, Kristen R Ryan, Yasuhiro Iwata, Weihsueh A Chiu, Frederick Parham, Jessica A Wignall, Blake Anson, Evan F Cromwell, Mamta Behl
Journal: Toxicology and Applied Pharmacology (2017)
Study of the relationship between AGEs and oxidative stress damage to trophoblast cell mitochondria
Authors: Lingling Jiang, Jianying Yan, Lixiang Wu
Journal: Ginekologia Polska (2017): 372--378
相关产品
| 产品名称 | 货号 |
| Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合微孔板检测 | Cat#22800 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验染料的浓度，引起假去极化。荧光探针JC-1是一种阳离子型的亲脂性染料，能够自由穿过细胞膜，随细胞膜电位的变化而在膜两侧保持动态平衡。其特点是线粒体膜电位低时浓度低，主要以单体形式存在，488nm激发时最大发射波长为527nm，呈绿色荧光，胞浆相对线粒体为低电位，形成流式图中所有细胞FL1均为阳性；膜电位高时浓度高形成聚集体，488nm激发时的最大发射波长为590nm，红色荧光。活细胞线粒体膜电位高，线粒体内JC-1聚集体的浓度高，红色荧光很强，在流式图上表现为FL1和FL2双阳性，而凋亡细胞则大多
Cell：清华俞立团队首次发现迁移体介导的线粒体胞吐，一种新型线粒体质控过程
的绝大多数线粒体都是 MitoSOX 阳性的，并且通过线粒体探针 TMRM 染色证实迁移体内的线粒体已经失去了线粒体膜电位。图片来源：Cell2、肌动蛋白选择性结合受损的线粒体那么受损的线粒体如何被感知并转运到迁移体中呢？TEM 分析表明，受损的线粒体可能被选择性地转运至细胞周围。为了验证该假设，该研究首先分析了 KIF5B 和动力蛋白在分离的线粒体上的募集。研究发现，用 10 mM CCCP 处理细胞会显著降低肌动蛋白的线粒体募集并增加 KIF5B 的募集。相比之下，用 2 mM CCCP 处理
分钟，吸取单个核细胞层(中间白色层，含单核细胞和淋巴细胞)，加5倍PBS溶液，1000转/分离心5分钟，弃上清，得到淋巴细胞。再悬于含有10％热灭活的胎牛血清、1％青－链霉素、10mmol/L HEPES和1mmol/L谷胺酰胺的RPMI1640培养基中，37℃和5％CO2环境中培养24小时。 (2)检测线粒体膜电位(按JC-1说明书)： a.取10-60万细胞，重悬于0.5ml细胞培养液中； b.加入0.5ml JC-1染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育90分钟； c
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
