- ￥648
- 翌圣生物（Yeasen）
- 40707ES03
- 上海
- 2026年03月19日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃干燥避光保存
- 保质期：
有效期1年
- 英文名：
JC-10 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit
- CAS号：
点击查看
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 库存：
大量
- 规格：
1mg
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
外观 |
储存 |
价格（元） |
| JC-10 线粒体膜电位荧光探针 |
40707ES03 |
1mg (2 mg/mL) |
溶液 |
-20℃避光保存 |
680.00 |
| JC-10 线粒体膜电位荧光探针 |
40707ES08 |
5 mg |
红色粉末 |
-20℃避光保存 |
2763.00 |
产品描述
线粒体膜电位荧光探针JC-10是JC-1的升级产品，同样可用于检测线粒体膜电位的变化。因JC-1虽然在许多实验中被广泛应用，但是其水溶性很差，即使在1 μM浓度的条件下，JC-1也会在水的缓冲液中析出。而JC-10具有更好的水溶性，可以在某些需要高浓度染料的实验中替代JC-1。
正常细胞内，JC-10选择性聚集在线粒体基质中形成可逆的红色荧光聚合物（Ex=540 nm, Em=590 nm）；不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失，JC-10由多聚体转变为单体形式存在于胞浆中，产生绿色荧光（Ex=490 nm, Em=525 nm）。JC-10不仅可用于定性检测，因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测，因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。这两种颜色的变化可以用流式细胞仪上的标准滤光器检测到，绿色荧光可用FL1通道分析，红色荧光可用FL2通道分析。除了用于流式细胞术，也可以用于荧光成像和荧光酶标板检测平台。
在一些细胞系中JC-10有着比JC-1更好的表现。不过，JC-10的性能表现极具细胞依赖性特征。
产品性质
| 化学名称（Chemical name） |
5,6 -Dichloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide; Enhanced JC-1; |
| 分子式（Formula） |
C25H27Cl2IN4 |
| 分子量（Molecular Weight） |
583.34 |
| 纯度（Purity） |
＞95%（HPLC） |
| 外观（Appearance） |
红色粉末 |
| 溶解性（Solubility） |
溶于DMSO |
| 荧光光谱 （Fluorescent spectrum） |
单体形式（monomer form）：Ex=490 nm, Em=525 nm 聚合物形式（J-aggregate form）：Ex=540 nm, Em=590 nm |
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。粉末-20℃干燥避光保存，至少一年有效。储存液分装成单次使用量，-20℃干燥避光保存，避免反复冻融，约一年有效。
注意事项
1）JC-10是光敏感性的，所有染色步骤的操作过程中避免强光接触。
2）JC-10染色完成后，立即进行后续的结果分析非常必要；
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
工作液配制：
1）JC-10粉末（5 mg）：直接加2.5 mLDMSO到粉末内，室温颠倒混匀使其充分溶解，即得到2 mg/mL（约3 mM）的储存液。溶液分装成小量储存于-20℃，避光干燥，避免反复冻融。
2）JC-10储存液（1 mg in DMSO）：本品是JC-10的DMSO储存液，浓度为2 mg/mL（约3 mM）。使用者需要根据单次用量来分装，-20℃避光干燥，避免反复冻融。
3）工作液配制（现配现用）：将冻存的储存液置于室温充分融化，之后用HHBS（1×Hanks with 20 mM Hepes buffer, pH 7.0）或其他缓冲液（pH 7-8，含0.02% Pluronic® F-127）配制成10-30 µM 1×工作液。涡旋混匀。
注：对于某些细胞，在pH 8情况下可能会阻止JC-10渗透入细胞。
JC-10染色步骤（荧光酶标仪）
1）细胞准备
贴壁细胞： 细胞养过夜使其密度达到2×104~8×104 cells/well/90 μL（96孔板）或者5×103~2×104cells/well/20μL (384孔板)。
悬浮细胞：离心后重新将细胞悬浮在培养液中1×105~2×105 cells/well/90 μL（多聚赖氨酸包被的96孔板）或者 2.5×103~5×104 cells/well/20 μL(多聚赖氨酸包被的384孔板)。实验前800 rpm离心2分钟。注意：不同的细胞系需要根据具体情况优化凋亡实验用的最佳细胞密度。
2）用实验药物（10 µL 10×化合物）处理细胞一段时间以诱导细胞凋亡（例如，用camptothecin处理Jurkat细胞4-6 h)。空白对照（只有培养基不含细胞）中加入相同量的药物。
注：药物处理前没有必要清洗细胞。但是，如果药物对血清敏感，可在加入药物前吸掉培养基和血清因子。然后加入等量体积的HBSS溶液到孔内。或者细胞直接培养在无血清培养基内。
3）加入100 µL/孔（96孔板）或25 µL孔（384孔板）JC-10工作液。
4）37℃，5% CO2孵育15-60 min。具体孵育时间取决于细胞类型和细胞浓度。每次实验建议优化体系。
5）直接进行荧光变化检测，记录Ex/Em = 500/525 nm（FITC通道）和540/595 nm（TRITC通道）的荧光
值，然后计算红色荧光信号与绿色荧光信号的比值，用来判断细胞健康程度。
（可选）或者，吸除JC-10工作液，加入100 µL/孔（96孔板）或25 µL/孔（384孔板）HHBS，再进行后续的荧光酶标仪检测。
JC-10染色步骤（荧光显微镜或流式细胞仪）
1）培养细胞过夜使其在药物处理以诱导凋亡时的密度为：5×105~1×106 cells/mL。选择实验药物处理细胞一段时间以诱导细胞凋亡（例如，用camptothecin处理Jurkat细胞4-6 h)。
注：进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过1×106 cells/mL，也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。
2）离心，去上清，每管得到1-5×105细胞。
3）用500 µL JC-10工作液重悬细胞。
4）室温孵育或37 ℃，5%CO2孵育15-60 min，需避光。具体孵育时间取决于细胞类型和细胞浓度。
5）用荧光显微镜分别观察Ex/Em = 490/525 nm（FITC通道）和540/595 nm（TRITC通道）的荧光变化；或者用流式细胞仪（FL1和FL2通道进行检测）。
（可选）或者，吸除JC-10工作液，加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL/孔（384孔板）HHBS，再进行后续的荧光显微镜检测。
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文献和实验[2] Xu Y, Zhang Y, Xu Y, et al. Activation of CD137 signaling promotes macrophage apoptosis dependent on p38 MAPK pathway-mediated mitochondrial fission. Int J Biochem Cell Biol. 2021;136:106003. doi:10.1016/j.biocel.2021.106003(IF:5.085)
[3] Xu S, Yang X, Qian Y, Luo Q, Song Y, Xiao Q. Analysis of serum levels of organochlorine pesticides and related factors in Parkinson's disease. Neurotoxicology. 2022;88:216-223. doi:10.1016/j.neuro.2021.12.001(IF:4.294)
一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件，发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体膜电位崩溃，细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针，可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态，两者发射光谱不同。在正常细胞内，线粒体膜电位较高，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可产生红色荧光；凋亡早期，线粒体膜电位降低，JC-1不能聚集在线粒体基质中，此时JC-1为单体
- 1 Channel 收集的绿色荧光信号，来自 JC- 1 monomer；纵轴示 FL- 2 Channel 收集的红色荧光信号，来自 JC- 1 aggregates。5. C 图细胞群为正常对照，我把细胞群摆在近中央的位置。D 图是 CCCP 处理过的细胞，相对于对照，可见 CCCP 处理的细胞群往右下方发生移动，即红色荧光减弱，绿色荧光增强，这表明 CCCP 处理导致线粒体膜电位下降。6. 如何定量分析：通过 winMDI 2.9 软件可分别得到 FL- 1 channel 和 FL- 2 Channel
染料的浓度，引起假去极化。荧光探针JC-1是一种阳离子型的亲脂性染料，能够自由穿过细胞膜，随细胞膜电位的变化而在膜两侧保持动态平衡。其特点是线粒体膜电位低时浓度低，主要以单体形式存在，488nm激发时最大发射波长为527nm，呈绿色荧光，胞浆相对线粒体为低电位，形成流式图中所有细胞FL1均为阳性；膜电位高时浓度高形成聚集体，488nm激发时的最大发射波长为590nm，红色荧光。活细胞线粒体膜电位高，线粒体内JC-1聚集体的浓度高，红色荧光很强，在流式图上表现为FL1和FL2双阳性，而凋亡细胞则大多
