- ￥100 - 1600
- Arcegen
- N132017E
- 美国
- 2026年04月01日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
2×High-Fidelity Long PCR Master Mix (With Dye)
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海魔兜儿
- 保存条件：
-20度
- 规格：
250 μL/1 mL/5 × 1 mL
| 规格： | 250 μL | 产品价格： | ￥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 1 mL | 产品价格： | ￥480.0 |
| 规格： | 5 × 1 mL | 产品价格： | ￥1600.0 |
2×High-Fidelity Long PCR Master Mix (With Dye)是即用型2×预混合溶液，包含High-Fidelity DNA Polymerase，dNTPs以及优化的缓冲体系，预混液中含有预先添加的电泳指示剂，PCR产物可直接进行电泳，扩增产物为平末端，延伸速度为10 sec/kb。其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍，是普通Pfu DNA 聚合酶的9倍，适用于复杂模板扩增。2×High-Fidelity Long PCR Master Mix (With Dye)具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，反应体系只需加入引物和模板即可。另外，该产品还含有特异保护剂，使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
产品信息
| 货号 | N132017E | N132017S | N132017M |
| 规格 | 250 μL | 1 mL | 5×1 mL |
-25~-15℃保存，有效期1年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于科研。
使用说明
1，冰上融化试剂 ，混匀后备用。
2，冰上配制表 1 中的 PCR 扩增反应液。配制完成后充分混匀离心。
3，若模板为粗提样本 ，建议添加体积不超过反应体系的 5%。
表1. PCR 扩增反应体系
| 组分 | 体积 (µL) |
| 模板(10~200ng) | x |
| 正向引物(10 μM)* | 2 |
| 反向引物(10 μM)* | 2 |
| 2×High-Fidelity Long PCR Master Mix (With Dye) | 25 |
| ddH2O | Up to 50 |
4，将PCR管转移到PCR仪根据表2进行片段扩增。
5，推荐PCR扩增程序
表2. PCR 扩增反应程序
| 温度 | 时间 | 循环数 |
| 98°C | 30 sec | 1 |
| 98°C | 10 sec | 30-35（根据实验要求） |
| 60°C* | 5 sec | |
| 68°C~72°C** | 5~10 sec/kb | |
| 72°C | 2 min | 1 |
| 4°C | Hold | - |
**延伸温度和时间：10 kb以上长片段或较高GC片段扩增，推荐使用68°C，10 kb及10 kb以下片段且gc在40%~60%的片段扩增，可以尝试72℃延伸。当扩增效果不理想时，延伸速率根据实际结果可在5 sec/kb~10 sec/kb之间进行调整，扩增片段＜10 kb时，延伸速率可选择5 sec/kb，当扩增片段≥10 kb时，延伸速率可选10 sec/kb。
6，吸取 5~8 µL 扩增产物，用1%的琼脂糖凝胶进行电泳，检测是否扩增出正确条带。
应用示例
1，Overlap PCR
1）扩增子1、扩增子2制备
表3. PCR反应体系配制（50 μL体系）
| 组分 | 使用量 |
| 2×High-Fidelity Long PCR Master Mix (With Dye) | 25 μL |
| 模板 1 DNA、模板 2 DNA | 10~100 ng |
| 一轮引物 F1（10 μM）、一轮引物 F2（10 μM） | 2 μL |
| 一轮引物 R1（10 μM）、一轮引物 R2（10 μM） | 2 μL |
| ddH2O | To 50 μL |
| 温度 | 时间 | 循环数 |
| 98°C | 30 sec | 1 |
| 98°C | 10 sec | 30-35（根据实验要求） |
| 60°C | 5 sec | |
| 72°C | 10 sec/kb | |
| 72°C | 2 min | 1 |
| 4°C | Hold | - |
表5.二轮PCR反应体系配制（50 μL体系）
| 组分 | 使用量 |
| 2×High-Fidelity Long PCR Master Mix (With Dye) | 25 μL |
| 一轮扩增产物1（扩增子1） | 2~4μL |
| 一轮扩增产物1（扩增子2） | 2μL |
| 一轮引物F1（10 μM） | 2μL |
| 一轮引物R2（10 μM） | 2 μL |
| ddH2O | To 50 μL |
| 温度 | 时间 | 循环数 |
| 98°C | 30 sec | 1 |
| 98°C | 10 sec |
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