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- 2025年12月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
上海代轩生物科技有限公司
- 规格：
张
基于酪胺信号放大（TSA）的四重染色技术，通过四轮HRP-抗体催化不同荧光酪酰胺（如FITC/Cy3/Cy5/Alexa 750）共价沉积于抗原位点，每轮酸洗彻底剥离前序抗体复合物，结合光谱成像系统实现单切片四靶标同步超高分辨扫描（兼容组织/细胞样本）。
核心优势
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四维互作解析：突破传统荧光通道限制，精准定位蛋白空间共分布（如肿瘤微环境中CD8⁺T细胞/PD-L1⁺肿瘤细胞/FOXP3⁺Treg/Ki-67⁺增殖细胞同步成像）。
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纳米级灵敏度：TSA信号放大＞100倍，可检测单分子级低丰度靶点（如磷酸化激酶、罕见干细胞标志物）。
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零串色保障：酸洗+光谱解混技术彻底消除交叉干扰（多抗体种属兼容性＞95%）。
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高通量性价比：较流式细胞术节省60%样本量，4小时内完成，支持FFPE样本临床转化（如乳腺癌四联诊断：ER/PR/HER2/Ki-67）。
技术突破：为复杂生物系统提供经济高效的空间多组学方案，推动精准医疗与机制研究。
关键应用场景：
肿瘤免疫治疗：同步量化PD-1、CTLA-4、CD68、CD163揭示免疫抑制微环境
神经退行研究：共定位β-淀粉样蛋白（Aβ）、Tau、小胶质细胞（Iba1）、突触蛋白（Syn1）
药物动态监测：靶向药干预后p-EGFR/p-AKT/凋亡标记（CC3）/血管标记（CD31）四维评估
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文献和实验实验流程：多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上，随后即可衔接下一轮单标染色，直至全部标记完成，即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合：1）新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2）梯度乙醇浸片，100% 5min；95% 5min；70% 2min。3）灭菌水洗片1min，重复3次。4）10%中性福尔马林浸片10min，灭菌水洗片1min，重复3次。2.微波修复：1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中，用抗原
的差异，使得各组织或穿刺标本间对某一生物分子的测定更具有可比性。下面我们以实例简要介绍对组织芯片采用免疫荧光组织化学染色(Cy3探针标记)。 组织盘属蛋白酶抑制剂―1（tissue inhibitor of methalloproteinase-1,TIMP-1)广泛存在于各种组织中，在乳腺癌细胞中表达明显增加。采用免疫荧光组织化学技术(Cy3探针标记)对乳腺癌组织芯片中TIMP―1进行染色，并利用生物芯片扫描仪定量分析，可高效率地检测TIMP-1在大量乳腺癌组织中表达的改变。采用
技术原理与方法｜超级色差校正物镜 PLAPON60XOSC 在脑组织四重免疫荧光分析中的应用
的形成。比例尺：5 μm。 成像系统： 显微镜：奥伟登（Evident）共聚焦激光扫描显微镜 FV1200 *奥伟登（Evident）现已推出全新共聚焦显微镜 物镜：PLAPON60XOSC（60X, NA：1.4） 激光器：405 nm，473 nm，559 nm，647 nm 3. 结论 如图（1）和（2）所示，针对多种功能分子和细胞标志物的四重免疫荧光可以提供有关细胞表达和亚细胞定位的详细信息，其中包括相关功能细胞与细胞间空间距离的相互依赖或独立关系。重要的是，显微镜的检测灵敏
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