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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
一周内
- 英文名:
Lentiviral Concentration Kit
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海魔兜儿
- 保存条件:
4度
- 规格:
50mL
慢病毒浓缩试剂盒中含有的5×浓缩液,能对所有类型的慢病毒颗粒进行浓缩。本试剂盒操作简单,仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并短时间孵育,再离心,即可得到浓缩的慢病毒颗粒,回收率高达90%以上,可提高100倍病毒滴度。
产品规格
| 货号 | C230130E |
| 规格 | 50 mL |
冰袋运输。2~8℃保存,有效期6个月。
注意事项
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本产品仅用于科研。
使用说明
1. 收集慢病毒上清液,0.45 μm滤膜过滤,以除去细胞和碎片。
【注】如果使用滤膜过滤,只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜。不能用硝酸纤维素膜(NC)。
2. 将慢病毒上清与试剂盒中的浓缩液按照4:1的比例混合(上清液4份,浓缩液1份),4℃孵育2 h或过夜。刚开始时每隔30 min混匀一下,混匀进行 3次。
【注】延长孵育时间可以提高回收率。慢病毒颗粒在4℃可以稳定保存数天。
3. 于 4℃,4000 g离心25 min。
4. 小心去除上清,不要晃动管子,一般可见白色沉淀(有时沉淀不可见)。
5. 用初始体积(原上清液体积)1/10- 1/100的DMEM或PBS重悬病毒颗粒,小心吹打均匀,重悬沉淀物。
6. 测定浓缩慢病毒样品的滴度,50 µL/管分装,于-80℃冰箱保存。
【注】慢病毒冻存液避免反复冻融,否则会降低病毒滴度。
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文献和实验良好的的基因治疗效果,在美国已经开展了临床研究,效果非常理想,因此具有广阔的应用前景。 慢病毒转染优点:1.外源基因表达水平较高、表达稳定;2.转染效率高,可感染分裂和不分裂的细胞,几乎可以感染所有类型的细胞,特别适合质粒载体转染效率低的细胞;3.慢病毒基因容易操作,易于制备大量病毒且滴度高;4.病毒基因组可整合到细胞基因组,易于构建稳定细胞株。 慢病毒包装技术:慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。将外源基因克隆进入表达载体,同时与包装质粒(表达病毒包装所需辅助蛋白)一起转染
,可以满足各类实验的使用要求。 慢病毒包装试剂盒 MCE 慢病毒包装试剂盒基于第二代慢病毒包装系统,同时可兼容第二代和第三代慢病毒包装质粒。经 MCE 慢病毒包装试剂盒包装的慢病毒具有感染效率高、感染谱广等特点,可实现外源基因在宿主细胞中的稳定持续表达。 慢病毒溶解缓冲液 采用 HEPES 和碳酸氢钠缓冲体系,含有 L-谷氨酰胺、微量元素、冻存保护剂等成分, 可用于超速离心、PEG 沉淀或超滤浓缩后的慢病毒重悬。 慢病毒浓缩试剂 (5×) 针对慢病毒富集优化的高效聚合
特异性更高。您可以根据实验设计需要进行选择。 2、慢病毒包装载体:Cas9 慢病毒表达载体采用 3 质粒慢病毒系统。您可使用我公司的 pH1、pH2;addgene 载体 psPAX2、pMD2.G 或者 pCMV-dR8.2 dvpr、pCMV-VSVG 均可包装成功。 3、无内毒素质粒提取试剂盒。使用质量可靠的质粒提取试剂盒可以提供更高的转染效率和病毒包装效率。我们采用 Qiagen 的 Plasmid Plus 系列产品可以取得满意的包装效果。 4、转染











