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- 北京
- 2025年07月16日
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- 文献和实验
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北京诺博莱德科技有限公司
BD 小鼠造血干/祖细胞mouse HSPC分离试剂盒
简要描述：
产品名称：BD 小鼠造血干/祖细胞mouse HSPC分离试剂盒
产品货号：560492
产品品牌：BD
产品规格：100 Tests
保存条件：2-8℃，避免长时间暴露于光下
应用：流式细胞术（已验证）
反应性：小鼠
监管状态：研究使用（RUO）
产品简介
BD Stemflow™ Mouse Hematopoietic Stem and Progenitor Cell Isolation Kit 是一种用于从小鼠骨髓中分离造血干/祖细胞（HSCs/HPCs）的试剂盒。该试剂盒通过多色流式细胞术提供了一套完整的解决方案，能够高效、高纯度地分离造血干/祖细胞。
产品特点
多色流式细胞术：试剂盒包含针对CD34、c-Kit、Sca-1和Lineage Cocktail的荧光标记抗体，以及相应的同型对照抗体。
高纯度分离：通过流式细胞术分选，可实现高达84%的细胞纯度。
优化的实验流程：提供详细的实验方案和分析指南，确保实验的高效性和可重复性。
兼容性强：适用于多种流式细胞仪平台，无需额外设备。
试剂盒组成
荧光标记抗体：CD34 FITC、c-Kit PE、Sca-1 PE-Cy™7、Lineage Cocktail APC。
同型对照抗体：用于区分特异性染色和非特异性背景。
补偿珠：BD™ CompBead补偿颗粒。
其他试剂：7-AAD染料。
实验流程
细胞制备：从小鼠骨髓中制备单细胞悬液。
染色：加入荧光标记抗体进行染色。
流式细胞术分析：使用流式细胞仪进行细胞分选和分析。
数据处理：根据补偿珠设置实验参数，分析细胞表型。
应用场景
造血干/祖细胞分离：从小鼠骨髓中分离高纯度的HSCs/HPCs。
细胞功能分析：分离后的细胞可用于功能实验、基因表达分析和表型鉴定。
疾病模型研究：用于研究造血系统相关疾病。
注意事项
试剂中含有叠·dan化·钠，处理时需小心。
保存时需避免长时间暴露于光下。
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文献和实验中。5. 用无菌 PBS 将上述锥形试管填满（至 50 mL)。介绍样品制备。6. 洗涤。在室温、低速制动条件下，以 300 X g 离心分离试管 10 分钟。7. 裂解红细胞（BD 产品目录号：555899，10 x 溶液。在蒸馏水中使用 1 x 溶液。室温孵育 15 分钟。）8. 将 1x106 PBMC 重悬于 20 μL 染色缓冲液中（PBS 含有 5% 正常人血清）。9. 加入抗体：CD117-BV421 (c-kit)、CD7-BV510、CD57- BV605、CD8-BV650
裂解缓冲液 200mM NaOH;1% SDS P3 中和缓冲液 3.0M Kac(pH5.5) QBT 平衡缓冲液 750mM NaCl;50mM MOPS(pH7.0);15%异丙醇;0.15% Triton X-100 QC 洗涤缓冲液 1.0 M NaCl;50mM MOPS(pH7.0);15%异丙醇 QF 洗脱缓冲液 1.25 M NaCl;50mM Tris-HCl(pH8.5);15%异丙醇 2. 培养菌液离心6000xg
共沉淀 如果在非变性的条件下裂解细胞，蛋白质之间的相互作用还可以保持，所以就可利用免疫共沉淀方法找出相互作用的蛋白质。这其中的例子包括Harlow等。 利用抗体沉淀腺病毒的EIA蛋白时发现了真核细胞中有与EIA蛋白特异结合的蛋白质；McMahon等利用该方法确定了转录结构域相关蛋白质可以与E2F1和c-Myc转录因子相互作用的蛋白质。 免疫共沉淀既可以用于检验已知的两个蛋白质在体内的相互作用，也可以找出未知的蛋白质相互作用，不管是两者的哪个，其原则都是一样的，都需要用特异性的抗体与其中的
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