BD 558049 裂解/固定缓冲液

BD 558049 裂解/固定缓冲液

 

简要描述：

产品名称：BD 558049 裂解/固定缓冲液

产品货号：558049

产品品牌：BD

产品规格：250 mL

产品介绍：

BD Phosflow™ 裂解/固定缓冲液旨在用于裂解和固定全血，用于细胞内流式细胞术。例如，在用激酶激活剂（如佛波醇酯）刺激细胞后，BD Phosflow™ 裂解/固定缓冲液可用于一步裂解红细胞和固定白细胞。这使研究人员能够快速使激酶、磷酸酶和/或蛋白酶失活，从而可以检查细胞的体内磷酸化状态。BD Phosflow™ 裂解/固定缓冲液可保持细胞的光散射特性，可用于人和小鼠全血。在制备用于淋巴细胞亚群分析的 PBMC 时，全血裂解已被证明与密度梯度离心一样有效。在许多情况下，磷酸化特异性抗体可与细胞表面标记物（如 CD 标记物）染色同时使用。然而，并非所有细胞表面标记都与 BD Phosflow™ 裂解/固定缓冲液兼容。

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产品用途：用于裂解和固定全血，用于细胞内流式细胞术

推荐实验流程：

流式细胞仪:

1.收集存在EDTA或肝素的正常人体血液，并在适用的情况下使用适当的活化剂进行处理。

2.用去离子水或蒸馏水(室温)稀释所需量的BD Phosflow™Lyse/Fix Buffer (5X浓缩液)1:5，然后将溶液预热至37°C。每次实验时，应将1X工作溶液制成新鲜溶液，实验结束时应丢弃任何剩余溶液。

3.将一卷血液与20卷预热的BD Phosflow™Lyse/Fix Buffer (1X)混合。通过大力翻转试管8-10次混合均匀，然后将试管在37°C的水浴中孵育10分钟。

4.在台式离心机中以500x g的速度将细胞旋转8分钟，吸出上清液，用Hank's溶液清洗细胞一次。

5.通过加入适当的渗透试剂，如冷BD Phosflow™Perm Buffer II，缓慢地旋转，使细胞松弛并渗透细胞。在冰上孵育30分钟，然后旋转细胞。

6.清洗细胞两次，用BD Pharmingen™染色缓冲液重悬。

7.用合适的抗体在室温下染色30-60分钟，清洗后准备流式细胞仪分析。