- ￥155 - 5765
- 翌圣生物（Yeasen）
- 10165ES
- 上海
- 2025年10月20日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 英文名：
Hieff Canace® Long PCR Master Mix (No Dye)
- 保质期：
1年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-25~-15℃保存
- 规格：
1ml/5×1ml/25×1 mL/250 μL
| 规格： | 1ml | 产品价格： | ￥465.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5×1ml | 产品价格： | ￥1165.0 |
| 规格： | 25×1 mL | 产品价格： | ￥5765.0 |
| 规格： | 250 μL | 产品价格： | ￥155.0 |
Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix (No Dye)是即用型2×预混溶液，包含High-Fidelity DNA Polymerase，dNTP以及针对长片段扩增而精心优化的缓冲体系，延伸速度为10 sec/kb。其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍，是普通Pfu DNA 聚合酶的9倍，适用于复杂模板扩增，扩增产物为平末端。
Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix (No Dye)具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。可扩增GC含量在20%~80%的片段。可以扩增未经核酸提取的全血样本，适用于EDTA、柠檬酸盐或肝素保存的血液，以及干血斑卡片，更加快速灵活。此外，本品中还含有特异保护剂，使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检，最高程度保障产品优异性能与批次间稳定性。
- 长片段扩增：最长可扩增40kb片段
- 快速延伸：5-10秒/kb延伸速度，省时高效
- 保真性好：83×Taq
- 适用性广：覆盖20-80%GC的片段，耐受好
- 灵敏度高：可检测低至1 pg的λDNA，100pg的基因组DNA
- 稳定可靠：可反复冻融30次
- 最长可扩增40kb片段
最长可扩增40kb片段。以50 ng人基因组DNA为模板，扩增1-40 kb片段，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix延伸速度10kb片段以下设置5 sec/kb，10kb片段以上设置10 sec/kb。M1：1 kb DNA Ladder；M2：50 kb DNA Ladder。结果显示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix可以扩增长达40 kb的人基因组片段。
- 可保证cDNA长片段扩增
可满足长片段cDNA扩增。以翌圣快速反转录试剂盒(Cat#11149ES)反转录293 RNA得到的产物为模板，扩增不同长度的cDNA片段。M1：1 kb DNA Ladder；M2：DL15000 DNA Marker。结果显示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix可满足1kb-14kb的cDNA扩增。
- 保真性好，可达83×Taq
保真性为83×Taq。采用二代测序方法测量保真度。结果显示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix保真度是Taq DNA聚合酶的83倍。
- 耐受性好
可耐受一定程度的菌液。分别以不同量的菌液作为模板，结果显示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix可耐受12.5%比例的菌液，且扩增特异性好。
可耐受一定量cDNA原液。以不同量11149ES的植物反转录产物和动物反转录产物为模板进行扩增(50 μL总体系)。M：DL10000 DNA Marker。结果显示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix可满足15%的cDNA投入量。
- 灵敏度好
分别以1 pg-1 μg不同投入量的拟南芥基因组DNA、小鼠基因组DNA和质粒为模板，进行扩增电泳。结果显示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix灵敏度好，多数情况下可保证少投入量模板扩增。
-25~-15℃保存，有效期1年。
Q：10165ES这款产品在进行10kb以上的长片段扩增时，是否还按照10kb以下的反应程序去运行？
A：针对10 kb以上的片段时，尽量选用68℃和10 sec/kb两者进行搭配，以提高扩增成功率。10kb以下的，可以选用5 sec/kb的扩增速度。
Q：10165ES这款产品能否用于长片段的cDNA扩增？实验中有什么建议？
A：（1）10165ES这款产品可满足1 kb-14 kb cDNA扩增，如果要进行长片段扩增，推荐使用翌圣生物经验证的11149ES反转录试剂盒对目的RNA进行反转录，得到的cDNA模板搭配10165ES进行长片段扩增。
（2）如果RNA样本较少或者需要获得很长的意向片段，建议反转录时不进行消化。意向片段越长，投入的RNA就需要越多，对应的cDNA也需要越多。
Q：若扩增产物存在突变怎么办？
A：10165ES是一款高保真的PCR产品，高保真意味着低错误率，更准确的序列。但不同的实验方式会存在差异，产物突变为低概率事件，建议新扩增多个重复组，从而获得未突变的扩增产物。
Q：10165ES可以扩增高GC含量的片段吗？
A：可以，经测试，10165ES可覆盖20-80% GC含量的片段，建议扩增高GC含量片段时，温度调整到68℃，成功率会大幅提升。
Q：我的样本为菌液，是否可以直接使用10165ES去扩增菌液？
A：10165ES可耐受一定程度的菌液，经测试，该产品可耐受比例占比在反应体系12.5%比例的菌液，且特异性较好，如果有需求进行菌液直扩，请将比例控制在12.5%以下。
Q：Hieff Canace® Long PCR Master Mix(No Dye)能否用于扩增含有尿嘧啶的cDNA模板？
A：10165ES这款产品可耐受一定量的cDNA原液，其中就包含有残留的RNA和降解的RNA，因此可以用含有尿嘧啶的cDNA作为模板，但存在一定量的范围，经产品性能测试，10165ES可满足比例占比在反应体系15%的cDNA投入量。
Q：Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix(No Dye)能检测出多少投入量的样本？
A：（1）针对植物基因组，经产品性能测试，最低能检测出100pg的植物基因组。
（2）针对动物基因组，经产品性能测试，最低能检测出100pg的动物基因组。
（3）针对质粒，因质粒本身较为纯净，经产品性能测试，最低能检测出1pg的质粒。
Q：为什么我收到10165ES用过几次没有问题，这一次扩增长片段的时候却没有条带？
A：可能原因及解决方案：
(1) 10165ES的解冻要求需要在冰上缓慢解冻，不能常温解冻或者加热解冻。
(2) 在扩增长片段时，建议温度设置68℃，扩增速度为10 sec/kb。
(3) 扩增意向片段越长的时候，投入的模板应当越多。
(4) PCR 体系中引物浓度偏低或循环数不足：适当增加引物用量，或者增加扩增循环数；
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文献和实验PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增（左图）与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增（右图）。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液，您只需添加模板和引物，然后，开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤，使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样（注意：确保染料与下游应用兼容）。直接
说明都显示单片段插克隆效率> 95%——片段越多效率会下降的）。市售产品中，是否包含感受态细胞，是否包含质粒纯化试剂或者 PCR 纯化试剂，都会影响产品单价。 后继的筛选验证工作同经典方法一样——抗性筛选，挑克隆扩增纯化，电泳+酶切或者 PCR 验证，最后挑几个最有可能的克隆去测序验证。如今分子克隆中的 PCR 一般都会选择高保真酶——出错率比 Taq 低得多、扩增长片段效果更好，要是几十 kb 还得是 EX 加长版高保真酶——相比后继测序验证的费用，这钱万万省不得的。 总而言之，基于同源序列的无缝
（一） 试剂 1.pMDTM18-T Simple Vector Kit（Takara公司）。 2.TAE电泳缓冲液 3.琼脂糖（Agarose） 4.6×电泳加样缓冲液：0.25％ 溴粉蓝，40％(w/v) 蔗糖水溶液，贮存于 4℃。 5.溴化乙锭(EB)溶液母液：配制成10mg/mL，用铝箔或黑纸包裹容器，储
