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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)
- 保质期:
一年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-25~-15℃保存
- 规格:
1ml(10164ES03)/5×1ml(10164ES08)/250 μL(10164ES01)/100×1 mL(10164ES60)
| 规格: | 1ml(10164ES03) | 产品价格: | ¥565.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5×1ml(10164ES08) | 产品价格: | ¥1483.00 |
| 规格: | 250 μL(10164ES01) | 产品价格: | ¥93.00 |
| 规格: | 100×1 mL(10164ES60) | 产品价格: | ¥28285.00 |
产品简介
2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)是即用型2× 预混合溶液,包含Hieff Canace® AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase,dNTPs以及优化的缓冲体系,预混液中含有预先添加的电泳指示剂,PCR产物可直接进行电泳,扩增产物为平末端。2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系只需加入引物和模板即可。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
储存条件
-25~-15℃保存,有效期1年。
使用说明
- 推荐PCR反应体系
| 组分 | 体积 (μL) | 终浓度 |
| 2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)* | 25 | 1× |
| 模板** | x | - |
| 正向引物F(10 μM)*** | 2 | 0.4 μM |
| 反向引物R(10 μM) | 2 | 0.4 μM |
| ddH2O | Up to 50 | - |
表1 PCR反应体系
*在1× 预混液含有2 mM Mg2+和200 μM的dNTPs。
**推荐范围10-200 ng;cDNA样本上样量范围不超过反应体系的1/10,推荐1-2.5 μL。
***PCR 反应体系中引物终浓度的范围为0.2-1 μM,推荐0.4 μM。
- 反应程序
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 98℃ | 30 sec | 1 |
| 变性 | 98℃ | 10 sec | 30-35 |
| 退火* | 60℃ | 5 sec | |
| 延伸** | 72℃ | 5-10 sec/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 2 min | 1 |
表2 PCR反应程序
*推荐温度:60°C,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为5 sec,可以在5-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
**延伸时间:推荐5 sec/kb,也可根据需要,适当延长至10 sec/kb。
注意事项
1.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2.本产品仅作科研用途!
Ver.CN20230707
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文献和实验章)。如果使用GSP,确保引物的Tm值与预计的保温温度相同。不要在高于60℃时使用oligo(dT)和随机引物。随机引物需要在增加到60℃前在25℃保温10分钟。除了使用较高的逆转录温度外,还可以通过直接将RNA/引物混合物从65℃变性温度转到逆转录保温温度,并加入预热的2×的反应混合物提高特异性(cDNA热启动合成)。这种方法有助于防止较低温度时所发生的分子间碱基配对。使用PCR仪可以简化RT-PCR所需的多种温度切换。 图6 温度对不同模板的影响 使用
成功做完了逆转录,这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多,即使使用了 qPCR 预混液,也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列(Q411 /Q421 /Q431 /Q441)提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时,引物设计需遵循以下原则:引物长度 18~25bp,产物长度 80~300bp,GC 含量 40~60
【资源】一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料
hotstart DNA 聚合酶。因此,与其他商业化的master mix 产品相比,Fast-Plus EvaGreen® qPCR Master Mix 可以为客户带来更为精确的实验结果。? EvaGreen®Dye:EvaGreen®是Biotium公司的DNA结合染料,它是一种同时适用于实时 PCR 和 高分辨率熔解曲线(HRM)分析的新一代染料。这种染料通过一种被称为“按要求释放”的全新机制,选择性的结合双链DNA。这一机制保证了较低的 PCR 抑制作用,同时也允许在染料饱和浓度以下进行高分辨率熔解





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