人肺微血管内皮细胞永生化

瑟瑞娜细胞库，温馨提示： 1、订购细胞株需提前了解（掌握）细胞培养的相关技术操作、无菌意识，了解相关的培养体系，生长特性等。 2、 提前准备好对应细胞的相关试剂，耗材，等 一、细胞接收后的处理： 1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。 2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。 3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。 4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。 二．细胞处理： 冻存细胞的复苏：： 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 对于贴壁细胞传代可以参考以下方法： 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。建议使用无血清细胞冻存液（SERANA:货号：WXQA100） 细胞株培养试剂 SERANA胎牛血清系列有： SERANA 胎牛血清AD级    货号：FSB-TZT018  销量王 SERANA 胎牛血清C级     货号：FSB-AS500 SERANA 胎牛血清B级     货号：FSB-UE500    性价比高 SERANA 胎牛血清A级     货号：FSB-ESA500 SERANA 胎牛血清S级     货号：FSB-AUS500 SERANA 碳吸附胎牛血清     货号：FSB-DT022 SERANA 超低IgG胎牛血清     货号：FSB-SG500 SERANA 透析型胎牛血清     货号：FSB-DU075 SERANA 热灭活胎牛血清     货号：FSB-HT500 SERANA 无外泌体血清       货号：EXO-FBS-50S-1   热销产品之一