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- 上海
- 2025年12月25日
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上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称：
胆碱蛋氨酸缺乏饮食（MCD）诱导脂肪肝模型
一、模型原理与病理机制
1. 核心致病机制
- 脂质代谢障碍
MCD饮食缺乏蛋氨酸和胆碱，导致肝脏磷脂合成受阻，极低密度脂蛋白（VLDL）组装和分泌减少，甘油三酯（TG）在肝细胞内蓄积，引发脂肪变性。 - 氧化应激与炎症
胆碱缺乏抑制脂肪酸β-氧化，活性氧（ROS）积累触发内质网应激，激活NF-κB等炎症通路，诱导脂肪性肝炎（NASH）及纤维化。 - 胆汁酸代谢紊乱
模型小鼠血清和肝组织胆汁酸谱改变（如石胆酸升高），加剧肝损伤。
2. 与人类疾病的相似性
- 病理特征：肝细胞大泡性脂肪变性、炎性浸润（以腺泡1区为主）、窦周纤维化。
- 局限性：缺乏胰岛素抵抗（人类NAFLD核心特征），且模型动物体重减轻，与人类肥胖型NASH相反。
二、标准化操作流程
（一）动物与饲料
| 参数 | 要求 |
|---|---|
| 动物品系 | C57BL/6小鼠（最常用，遗传背景清晰）或Wistar大鼠 |
| 年龄/体重 | 8-12周龄小鼠，体重20-25g |
| 饲料配方 | - MCD组：高蔗糖（40%）、中脂肪（10%），无蛋氨酸和胆碱 - 对照组（MCS） ：添加胆碱（2g/kg）+蛋氨酸（3g/kg） |
（二）饲养周期与监测
- 成模时间：
- 2-3周：显著脂肪变性+炎症（血清ALT/AST升高）
- 4-5周：纤维化形成
- 动态监测指标：
- 体重：每周记录（MCD组进行性下降）
- 血清生化：ALT、AST↑（肝损伤），血清TG↓（VLDL分泌障碍），肝TG↑
- 病理染色：
- HE染色：脂肪变性、炎性浸润评分
- 油红O染色：脂滴定量
- 天狼星红染色：纤维化程度
三、模型评价体系
（一）核心评价指标
| 指标类型 | 检测方法 | 意义 |
|---|---|---|
| 宏观变化 | 肝脏肿大、色泽变黄，肝指数（肝重/体重↑） | 脂肪变性程度 |
| 生化指标 | 血清ALT/AST↑、肝TG↑、血清TG↓ | 肝损伤与脂代谢障碍 |
| 组织病理 | - NAS评分（脂肪变性+炎症+气球样变） - 纤维化分期（Brunt标准） | NASH严重程度 |
（二）分子机制验证
- 氧化应激：SOD活性↓、MDA↑
- 炎症通路：IL-1β、TNF-α表达↑
- 修复通路：IGF-1/PTEN/Akt信号抑制（促凋亡）
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文献和实验比较常用的加速 NAFLD 和 NASH 动物模型的诱导方法，例如四氯化碳（CCl4）和蛋氨酸胆碱缺乏（MCD）饮食，以及第二代胆碱缺乏饮食。 开发临床前 NASH 纤维化模型 1. 使用四氯化碳进行炎症、脂肪变性和细胞死亡的毒素诱导 2. 通过 MCD 饲料诱导的肝脂肪变性 3. 增强 NASH 的新一代胆碱缺乏饮食，没有早期模型中观察到的重度体重减轻 本文对比了这些传统纤维化模型，探讨它们在纤维化和 NASH 药物开发方面的优势和局限性。 四氯化碳诱导 NASH
、Kupffer 细胞等多种因素相关。目前临床上的药物普遍存在毒副作用较大、价格昂贵等问题，而被证实的有效且无副作用治疗方法仅有适当的渐进性减肥运动这一项。 因此探索新型无毒副作用药物对其 NASH 临床治疗具有重要意义，而可靠的动物模型对探索 NASH 的发病机制及防治发挥着关键性作用。 目前国内外的NASH模型主要包括3类： ① 营养失调性脂肪肝动物模型，它包括了高脂饮食脂肪肝动物模型、高糖饮食脂肪肝动物模型和蛋氨酸胆碱缺乏（MCD）脂肪肝动物模型。 ② 复合因素诱导的 NASH 模型，主要是以高脂
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