高脂饮食诱导脂肪肝模型

一、模型构建原理与核心机制

1. 致病机制

• 脂质代谢失衡
  高脂饮食（HFD）通过过量摄入饱和脂肪酸（如猪油）和胆固醇，导致肝脏游离脂肪酸（FFA） influx增加，超出β-氧化能力，甘油三酯（TG）在肝细胞蓄积（脂肪变性）。
• 胰岛素抵抗（IR）
  长期HFD抑制胰岛素受体底物（IRS）磷酸化，阻碍GLUT4转运，引发肝糖原合成减少与脂解增加，形成恶性循环。
• 炎症与氧化应激
  FFA积累激活Kupffer细胞释放TNF-α/IL-6，诱导肝星状细胞活化；同时ROS生成超过SOD清除能力，导致脂质过氧化（MDA↑）。

2. 与人类疾病的相似性

• 病理特征：大泡性脂肪变性（＞5%肝细胞）、小叶炎症、气球样变。
• 代谢表型：肥胖、高脂血症、IR（区别于MCD模型的体重减轻）。

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二、标准化操作流程

（一）动物选择与分组

参数	要求
先选品系	C57BL/6小鼠（易感IR）或 SD/Wistar大鼠（成本低，样本量大）
周龄/体重	小鼠6-8周（20-22g），大鼠180-220g
性别	雄性为主（避免雌激素保护效应）
对照组设置	普通饲料（脂肪供能＜10%）

（二）饲料配方关键参数

成分	比例	作用
脂肪来源	猪油（40-60%）+胆固醇（1-2%）	饱和脂肪酸诱导IR
糖类添加剂	蔗糖（20-40%）或果糖（10-30%）	促进肝脂新生
蛋白基础	酪蛋白（20%）	稳定饲料结构
高脂变体	致动脉粥样硬化饲料（ATH）：添加胆酸盐	加速纤维化

（三）造模周期与分期

阶段	时间	病理特征	检测指标
脂肪变性期	2-4周	肝细胞脂滴（油红O染色阳性）	肝TG↑、血清ALT正常
炎症期	8-12周	小叶内炎性浸润（CD68⁺细胞↑）	ALT/AST↑、TNF-α↑
纤维化期	16-24周	窦周纤维化（天狼星红染色阳性）	HA↑、LN↑、NAS评分≥4

注：大鼠纤维化形成快于小鼠。

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三、模型评价体系

（一）核心必检指标

类别	检测方法
血清生化	ALT/AST（肝损伤）、TG/TC（脂代谢）、FBG/INS（IR，HOMA指数）
肝脏脂质	氯仿-甲醇法提取肝TG/TC（mg/g组织）
组织病理	- HE染色：脂肪变性比例（＜30%为轻度，＞60%为重度） - 天狼星红：纤维化分期（0-4期）
炎症因子	ELISA检测TNF-α、IL-1β（肝匀浆或血清）

（二）分子机制验证

• 脂代谢通路：SREBP-1c/FAS（脂合成）↑、PPARα/CPT1（脂氧化）↓。
• 纤维化标志：α-SMA（星状细胞活化）、TGF-β1（胶原沉积）。