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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
170
- 英文名:
CHS56(RP4-8)
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
冻干粉
英文名称:CHS56(RP4-8)
形式:冻干粉
参考用途:科研
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
生长条件:37℃;24h;好氧;
存储条件:2-8℃
安全等级:1
形态:菌落形态:大小:1-2mm 形状:圆形 边缘:整齐 透明度:不透明 颜色:灰白色 隆起度:扁平 表面:光滑明亮 质地:湿润易挑起
操作步骤:
①准备 1 支含有 5~10mL 液体培养基的试管和 2 个平板;
②安全 柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂, 随后用镊子将其敲碎;
③吸取 0.5mL 液体培养基打入冻干管, 充分溶解后重新打回液体试管中,混匀;
④吸取 0.2mL 菌悬液 打入平板中,涂布均匀,重复两次获得两个平板;
⑤将液体试 管和平板全部置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
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文献和实验苄青霉素及 140 g/mL X-gal。作为载体的质粒都含有一种或两种抗生素的耐药基因,当把这种质粒转入大肠杆菌后,此菌便获得了抵抗这种抗生素的能力。目前分子克隆所用的克隆载体多含氨苄青霉素耐药基因,所以涉及最多的是氨苄青霉素筛选。当将氨苄青霉素加入培养基中后,只有含质粒的细菌能够繁殖,而不含质粒的细菌则不能繁殖形成菌落。此种筛选不能鉴别重组质粒或自身环化的质粒。在用含氨苄青霉素耐药基因的质粒进行克隆时,转化平板培养基中要加入氨苄青霉素。(四)质粒和菌株的保存:1. 质粒可以在-20 ℃ 冰冻保存。2. 菌株
实验目的1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。实验原理转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系,使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段,它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。转化中的受体细胞: 转化过程所用的受体细胞一般是限制性修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株,常用 RM 符号表示。转化方法:电击
后,不能稳定地共存于细菌的一个单细胞中,称之为不相容性质粒。例如:带有ColEl和pMBl复制子的质粒彼此不相容;而带有pSC101和p15A复制子的质粒却彼此相容。(3)转移性:在自然条件下,许多质粒都能通过细菌结合作用转移到新宿主菌内,而质粒上的mob基因为转移所必需的基因;同时在质粒上还需要nic/bom位点。(4)赋予宿主细胞一些遗传表型,如对抗生素的抗性。 mnidr 谢谢版主,那请问一下,原始的野生型大肠杆菌含有质粒吗?含有的是一种还是几种质粒呢?是固定
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