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- 库存:
220
- 英文名:
Escherichia coli K12 J53(RP4)
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
冻干粉
英文名称:Escherichia coli K12 J53(RP4)
形式:冻干粉
参考用途:独特的限制位点:Bam HI、Eco RI、 Hi dIII
培养基:蛋白胨:10.0,牛肉粉:3.0,氯化钠:5.0,琼脂:15.0,pH值:7.3±0.1(25℃)
生长条件:37℃;18-24h;好氧 存储条件 2-8℃
安全等级:1
形态 :纯度:纯
操作步骤:
①准备上述平板2块;
②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;
③吸取0.5mL无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入2块平板,200μL/个,涂布均匀;
④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
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文献和实验大肠杆菌K12品系 Escherichia coli K—12
为大肠菌的一个系统。 1922年在斯坦福大学从恢复期白喉患者体内分离得到的。原菌株用 Es cheric- hia coli K- 12(λ) F 表示,后来证明是λ噬菌体熔原菌、具有 F因子的雄株。 E. L. Tatum和 J. Lederberg用 X射线照射该株分离突变体,并发现通过雌雄接合而重组的现象,遂成为用细菌和噬菌体进行分子遗传学研究的开端,并广泛地应用于许多研究上。以后许多遗传分析都是用来自该菌株的诱变株进行的。目前它是生物界对染色体图被了解得最详细
大家对大肠杆菌应该很熟悉,它是分子生物学里最常见的工程菌。基因克隆、蛋白表达,这些就是在大肠杆菌中实现的,这和大肠杆菌的结构密切相关。 大肠杆菌 K12 大肠杆菌是一种革兰氏阴性菌,棒状,约 2.5 微米长。有鞭毛,它的基因组由 4 639 221 个碱基对组成,至少编码 4 000 个基因。 扫描电镜下的 E.coli K12 菌株最早是 1921 年从疟疾患者的粪便中分离得到,一直作为纯种保藏在实验室里,已有 75 年。大肠杆菌 K12 容易生长,并且关于它的代谢
发表[1,2,3]。国内针对外源基因在原核细胞中高效表达的关键因素,构建了高效表达载体[4],并在此基础上成功表达了一系列细胞因子的基因[5,6,7]。我们在分析了国内外有关在原核系统中表达蛋白的实验资料的基础上,对在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略所涉及的内容进行全面的总结,以期有助于我国在这方面的研究。 1.有效表达载体的构型 构建表达质粒需要多种元件,需要仔细考虑它们的组合,以保证最高水平的蛋白质合成。E.coli 表达载体的基本结构[8]。 启动子(以杂和的tac 启动子为例
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