Rosetta-gami(DE3)pLysS化学感受态细胞

感受态细胞名称：Rosetta-gami(DE3)pLysS Competent Cells；Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞

转化效率：1~5 × 10⁸ cfu/µg pUC19

基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10 trxB pLysSRARE (CamR, KanR, StrR, TetR)

抗性：氯霉素，卡那，链霉素，四环素

用途：蛋白表达

特点和简介

• 该菌株同时集合了Origami(DE3)和Rosetta(DE3)的优点；
• 细胞质Lon蛋白酶和和胞外膜上OmpT蛋白酶缺陷，有效减少目的蛋白降解；
• Origami菌株包括突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase) (trxB)和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase) (gor)基因，有利于高效形成正确折叠的含有二硫键的蛋白，增强蛋白的可溶性；
• Rosetta(DE3)菌株具有氯霉素抗性，补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平；
• λ噬菌体DE3溶原化衍生菌株，IPTG可以诱导在lacUV5启动子控制噬菌体T7 RNA聚合酶表达；
• 适合IPTG诱导的T7启动子载体，常用的pET系列载体；
• 携带pLysS质粒，具有氯霉素抗性，可以表达能降解T7 RNA聚合酶的T7溶菌酶，从而抑制T7 RNA聚合酶及目的蛋白本底表达；
• Rosetta-gami B(DE3)pLysS感受态细胞能够用于氨苄抗性和壮观霉素抗性质粒的原核表达；
• 亮氨酸生长缺陷型菌株。