Rosetta-gami 2(DE3)pLysS化学感受态细

感受态细胞名称：Rosetta-gami 2(DE3)pLysS competent cells；Rosetta-gami 2(DE3)pLysS感受态细胞

转化效率：1~5 × 10⁶ cfu/µg pUC19

基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10 trxB pLysSRARE2 (CamR, StrR, TetR)

抗性：氯霉素，链霉素，四环素

特点和简介

• Rosetta-gami 2系列菌株是集合了Rosetta 2系列菌株和Origami 2系列菌株的有点，增强了细胞内二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密码子的真核细胞蛋白的表达能力；
• 细胞质Lon蛋白酶和和胞外膜上OmpT蛋白酶缺陷，有效减少目的蛋白降解；
• 含有pRARE2质粒，除了能够提供原Rosetta(DE3)宿主菌含有的AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个稀有密码子的tRNA外，还提供了第七个稀有密码子CGG的tRNA，使得该宿主菌相对于其他大肠杆菌，能够提供更加“通用”的蛋白质表达，从而提升目的蛋白表达水平；
• Origami 2系列菌株是卡那敏感的K-12细胞菌株，携带有TrxB和Gor基因突变提高含二硫键正确折叠蛋白的高效表达。Gor基因突变使得菌株具有四环素抗性；
• λ噬菌体DE3溶原化衍生菌株，IPTG可以诱导在lacUV5启动子控制噬菌体T7 RNA聚合酶表达；
• 适合IPTG诱导的T7启动子载体，常用的pET系列载体；
• 携带pLysS质粒，具有氯霉素抗性，可以表达能降解T7 RNA聚合酶的T7溶菌酶，从而抑制T7 RNA聚合酶及目的蛋白本底表达；
• 亮氨酸生长缺陷型菌株。