- ¥180 - 1850
- YBscience
- YB4472
- 进口/国产
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Rosetta-gami(DE3)pLysS Competent Cell
- 保质期：
三年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
10×100ul / 20×100ul
| 编号 | 名称 | 规格 | 单位 |
| YB4472 | Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞 | 20×100ul | 包 |
| YB4472 | Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞 | 20×100ul | 包 |
Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞基本信息：
Rosetta-gami(DE3)pLysS基因型:
菌株类型:
E.coli
培养基:
LB培养基
生长条件:
37 ℃, 有氧
抗性:
氯霉素，卡那，链霉素，四环素
应用:
蛋白表达
质粒转化条件：
42 ℃热激
诱导方法:
IPTG
菌株特点:
1. Rosetta-gami系列菌株来源于Origami系列宿主菌，该系列菌株的有点除了含有Origami菌株原有的TrxB和Gor基因突变提高含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达，同时含有Rosetta系列菌株中含有的真核细胞稀有密码子。该菌株同时集合了Origami(DE3)和Rosetta(DE3)的优点。
2. Rosetta-gami(DE3)pLysS系列菌株含有pRARE质粒，能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个真核细胞中的稀有密码子tRNA，能够有效提升真核细胞蛋白的表达水平。pRARE质粒具有氯霉素抗性。
3. Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞同时具有氯霉素，卡那，链霉素和四环素四种抗生素抗性。
4. Rosetta-gami(DE3)pLysS被建议使用于含有Bla标记的氨苄抗性表达质粒。当使用pCDF系列载体时，还需要使用壮观霉素(Spectinomycin)进行筛选。菌株中 的rpsL突变使得该菌株具有链霉素抗
5. DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。
6. 含有pLSs质粒，pLySs质粒能够产生T7溶菌酶，可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。
7. 亮氨酸生长缺陷型菌株。
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文献和实验Rosetta-gami B 细胞死亡，生长极困难 毒性蛋白 更严格的本底表达控制 pLysS 菌株 无克隆生长 过高本底表达 更严格的本底表达控制 pLysS、pLysE 菌株 重组质粒和菌株的保存建议 在实验室里保存重组菌株的时候，为了挑菌和传代方便，我们常用LB平板保存在4℃冰箱中，需要提质粒和表达接种的时候，就直接从平板上挑菌，但是这种方法对于重组质粒的稳定性不利
21(DE3)融源菌则是添加T7聚合酶基因,为T7表达系统而设计. 真核细胞偏爱的密码子和原核系统有不同,因此,在用原核系统表达真核基因的时候,真核基因中的一些密码子对于原核细胞来说可能是稀有密码子,从而导致表达效率和表达水平很低.改造基因是比较麻烦的做法,Rosetta 2 系列就是更好的选择―― 这种携带pRARE2质粒的 BL21衍生菌,补充大肠杆菌 缺乏的七种(AUA,AGG,AGA,CUA,CCC,GGA 及CGG)稀有密码子对应的 tRNA,提高外源基因、尤其是真核基因在原核系统
2系列，thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)两条主要还原途径双突变菌株，显著提高细胞质中二硫键形成几率，促进蛋白可溶性及活性表达。（卡那霉素敏感）Rosetta-gami™ 2 则是综合上述两类菌株的优点，既补充7种稀有密码子，又能够促进二硫键的形成，帮助表达需要借助二硫键形成正确折叠构象的真核蛋白。（卡那霉素敏感）Origami B 是衍生自 lacZY突变的 BL21菌株，这个突变能根据IPTG的浓度精确调节表达
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