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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
50bp DNA Ladder, 50-1000bp
- 保质期:
一年
- 供应商:
魔兜儿
- 保存条件:
-20度
- 规格:
100 T/10×100 T
| 规格: | 100 T | 产品价格: | ¥110.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10×100 T | 产品价格: | ¥990.0 |
产品简介
本产品指示带如下图,由50 bp、100 bp、150 bp、200 bp、250 bp、300 bp、350 bp、400 bp、500 bp、600 bp、700 bp、800 bp、900 bp、1,000 bp共14条线状双链DNA片段组成,其中指示带250 bp和500 bp,浓度为100 ng/5 μL,其他条带均为40 ng/5 μL。该产品保存于1×DNA Loading Buffer中,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析,不适用于聚丙希酰胺凝胶电泳分析。

产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
N132111S |
N132111M |
|
N132111-A |
50 bp DNA Ladder |
500 μL |
10×500 μL |
|
N132111-B |
5×DNA Loading Buffer |
1 mL |
10×1 mL |
产品储存
室温或2-8℃保存,有效期半年;-25至-15℃保存,有效期1年,避免反复冻融。
操作说明
1. Ladder上样量为5 μL,若为宽胶孔,需适当增加上样量。
2. 建议使用1.5-2.0% Agarose,电压4-10 V/cm,0.5×TBE(优先选用)或1×TAE缓冲液电泳;
3. 通过EB、Arcegen核酸染料(Cat#N132109,无毒、适用紫外)等其他核酸染料通过泡染法进行染色时,在紫外灯下观察电泳条带。
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文献和实验打开峰图文件,依据图形初步判定测序质量,SAP酶纯化后的头峰杂度比较大,至少前50bp序列一般不可信,后续峰形如果还不错,主峰高、噪峰低、未见干扰峰,测序结果应该可信。一个正常的成功反应,能保证测序峰形清晰的长度为500 Bases (实际600 —800 Bases)。 在进行DNA测序时,紧接引物的10 — 30 Bases有时不一定能完全读清楚。 由于DNA结构上的原因,有时会出现反应中途无法进行之情况。如:G/C rich; G/C Cluster;Poly A、 Poly T的连续
及洗脱等多个环节相关。可以从以下几个角度进行优化: ①选择合适的琼脂糖凝胶浓度:100-500bp 用 2%,500-2000bp 用 1.5%,2000-10000bp 用 1%,确保 DNA 条带清晰且易于释放。 ②避免长时间紫外照射:尽量使用 302nm 长波长紫外灯,从切胶到放入溶胶 buffer 控制在 30 秒,也可选择蓝光染料及蓝光切胶仪。 ③溶胶要彻底:严格按试剂盒比例添加溶胶 buffer,随后 50-60℃ 水浴加热溶胶,期间每隔 2-3 分钟颠倒混匀一次,直至胶块完全溶解。 ④
变性梯度凝胶电泳法(denaturing gradinent electrophoresis,DGGE)
DGGE法分析PCR产物,如果突变发生在最先解链的DNA区域,检出率可达100%,检测片段可达1kb,最适围为100bp-500bp。基本原理基于当双链DNA在变性梯度凝胶中进行到与DNA变性湿度一致的凝胶位置时,DNA发生部分解链,电泳适移率下降,当解链的DNA链中有一个碱基改变时,会在不同的时间发生解链,因影响电泳速度变化的程而被分离。由于本法是利用温度和梯度凝胶迁移率来检测,需要一套专用的电泳装置,合成的PCR引物最好在5`末端加一段40bp-50bp的GC夹,以利于检测发生于高
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