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深圳市艾斯基因科技有限公司
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Olink微量蛋白组学
蛋白质组(proteome)早在1994年由澳大利亚科学家Wilkins和Williams提出,指通过高通量技术研究某一类细胞、组织所有蛋白的组成、功能及相互作用。蛋白质的传统研究方式是将蛋白质肽段通过质谱检测后与数据库的蛋白进行比对,这样的方法往往繁琐且特异性较差。PEA技术是一种非常适合于大规模的精准蛋白质组学研究工具,具有良好的灵敏度、快捷性、高通量分析、以及在多重通道水平上的特异性。作为一种商业化的生物标志物面板,Olink的产品在全球范围内得到广泛应用。
艾斯基因基于专利的PEA技术,秉承创新、严谨和透明的科学精神,开发并充分验证了一系列开创性的Olink Panel,通过在1 - 4ul体液中精确检测48-3072种生物标志物,解释病理的蛋白谱变化,为理解疾病过程带来新的见解。
Olink 蛋白标志物检测服务
蛋白质组(proteome)早在1994年由澳大利亚科学家Wilkins和Williams提出,指通过高通量技术研究某一类细胞、组织所有蛋白的组成、功能及相互作用。蛋白质的传统研究方式是将蛋白质肽段通过质谱检测后与数据库的蛋白进行比对,这样的方法往往繁琐且特异性较差。PEA技术是一种非常适合于大规模的精准蛋白质组学研究工具,具有良好的灵敏度、快捷性、高通量分析、以及在多重通道水平上的特异性。作为一种商业化的生物标志物面板,Olink的产品在全球范围内得到广泛应用。
艾斯基因基于专利的PEA技术,秉承创新、严谨和透明的科学精神,开发并充分验证了一系列开创性的Olink Panel,通过在1 - 4ul体液中精确检测48-3072种生物标志物,解释病理的蛋白谱变化,为理解疾病过程带来新的见解。
产品特点
超微量输入与高通量:1 ul血浆中可以同时检测48 ~ 384种蛋白标志物,3 μl血浆中可以检测1500多种蛋白标志物,已拓展至3072种蛋白标志物同时检测,并且很快将升级为4500种蛋白
超高灵敏:检测灵敏度可达fg / ml级别,可以在组学水平上检测疾病相关的成百上千种低丰度蛋白
高特异性:基于PEA专利、质控设计和充分验证,每个目标蛋白都具有靶向biomarker,克服了既往蛋白组学方法检测的特异性挑战。
宽动态:动态检测范围横跨10个log值,覆盖高、中、低丰度蛋白(尤其低丰度蛋白)
技术原理
邻位延伸分析技术(Proximity Extension Assay,PEA)是Olink独有的—种高通量、高特异性、高灵敏度、高动态范围的靶向蛋白质组定量技术。其原理是针对每个待检蛋白设计了一对抗体,抗体上偶联有特定的DNA单链(图1A);当这对抗体结合目标蛋白后(图1B),处于邻位的两条DNA单链可互补结合并经酶延伸形成双链DNA模板,巧妙地将蛋白质定量转换为DNA定量(图1C),最后利用微流控qPCR或NGS测序进行定量检测(图1D)。
样本类型
Olink所适用的样本非常广泛,适用于血清、各种血浆、组织裂解液、细胞培养液、脑脊液、细胞培养液、斑块裂解物、尿液、细胞裂解液、微泡/外泌体、组织液、微透析液、细针活检组织样本、干血斑、滑液、唾液、眼睛房水等


研究案例1:中国CKB队列揭示90多种血浆蛋白标志物与肥胖及心脏代谢风险的相关性
Associations of Adiposity, Circulating Protein Biomarkers, and Risk of Major Vascular Diseases
研究背景:在心血管疾病研究中,中国慢性病前瞻性研究项目(China Kadoorie Biobank,CKB)利用Olink技术对中国CKB的一个亚组(包含628名中国人群样本)进行了孟德尔随机化研究,以探索肥胖与90多种炎症及免疫相关血浆蛋白生物标志物的潜在关联,以及这些蛋白质生物标志物与心血管疾病风险的关联性。
发表期刊:JAMA Cardiol(IF=24)
研究技术:Olink蛋白标志物检测
研究结果:本研究经过对平均BMI相对较低的中国人群进行孟德尔随机化研究,结果表明肥胖与一系列炎症和免疫相关的血浆蛋白质生物标志物有关。其中多种血浆生物标记物与BMI的观察性和遗传性关联中存在一致性。此外还表明一些与BMI相关的血浆蛋白生物标记物与发生CVD的风险相关。这些发现为解释肥胖与心血管疾病和代谢性疾病的生物学机制提供了潜在的见解。

图1:研究个体入组流程图

图2.观察性和遗传工具化体重指数(BMI)与血浆蛋白组及发生心血管事件风险的关联
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文献和实验超微量外泌体蛋白质组突破用量极限和检测上限-低至200μL血浆!高达4000+ EV蛋白!
的多肽。通过该方法将外泌体裂解蛋白起始量降低至5μg,质谱前处理后采用布鲁克timsTOF平台进行direct-DIA,可稳定检出2500-3500+血浆EV蛋白!!! 微量蛋白质谱前处理样本制备方案 03 提升蛋白检出及可重复性的DIA质谱检测方案 DDA模式的lable-free定量蛋白质组学(LFQ)数据集将包含很多缺失值,影响较低丰度的蛋白质的检出。因此近年来DIA技术飞速发展与应用,其鉴定的蛋白总数多于LFQ,能鉴定到更多的低丰度蛋白,重复
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