olink蛋白质组学是什么

Olinkdànbáizhì组学在现代生物医学研究中的应用与原理

 

Olinkdànbáizhì组学是基于邻位延伸分析技术（Proximity Extension Assay, PEA）的高通量dànbáizhì检测平台，由瑞典Olink Proteomics公司开发。这一技术通过dútè的DNA编码抗体对实现超灵敏dànbáizhì定量，可在1-6μL微量样本中同时检测上千种dànbáizhì标志物，检测下限达fg/mL级别。与传统ELISA或质谱技术相比，Olinkdànbáizhì组学具有显著的技术优势：其PEA技术通过配对抗体识别目标蛋白后产生特异性DNA条形码，经PCR扩增后通过高通量测序或微流控芯片定量，避免了交叉反应并实现多重检测。目前提供三大检测面板：Inflammation（92种炎症相关蛋白）、Oncology（92种肿瘤标志物）和Cardiometabolic（92种心血管代谢蛋白），以及可定制化的Explore 1536面板。具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定。

 

Olinkdànbáizhì组学的核心技术在于其双抗体识别系统。每对匹配抗体分别标记有dútè的单链DNA序列，只有当两个抗体同时结合目标蛋白表位时，DNA序列才会通过连接酶作用形成可扩增的模板。这种设计使检测特异性比传统免疫检测提高10-100倍，同时动态范围可达10个数量级。实验流程包括样品制备（血清/血浆/细胞上清）、抗体孵育（1小时）、DNA模板形成（1小时）、qPCR或微流控定量（2小时），全程可在96或384孔板中完成。数据分析采用zhuānlì化的归一化算法，通过内部质控和外部参照校正技术变异。

 

在生物标志物发现领域，Olinkdànbáizhì组学已展现出dútè价值。2019年Nature Communications发表的研究利用Olink平台在35,000人队列中鉴定出85个与心血管疾病相关的蛋白标志物。技术的高灵敏度特别适合检测低丰度细胞因子和生长因子，如IL-6的检测限为0.15pg/mL，远低于常规ELISA的3-5pg/mL。2021年Science Translational Medicine报道的COVID-19研究通过Olinkdànbáizhì组学发现重症患者tèyǒu的蛋白特征谱，为疾病分型提供了分子依据。样本消耗量极小（1μL血浆可检测92种蛋白）的特点，使其在珍贵临床样本研究中具有bùkětìdài性。

 

质量控制系统是Olinkdànbáizhì组学可靠性的重要保障。每个检测批次包含三种质控：孵育控制（监测抗体结合效率）、延伸控制（评估DNA连接效果）和检测控制（验证PCR扩增效能）。数据输出采用归一化蛋白表达值（NPX），经过对数转换后便于统计分析。平台间变异系数（CV）控制在15%以内，批次效应通过ComBat算法校正。zuìxīn发布的Olink Explore 1536平台将通量提升至每次运行检测1,536种蛋白，覆盖分泌蛋白、膜蛋白和胞内蛋白等多个功能类别。

 

常见问题：

 

Q1. Olinkdànbáizhì组学与传统多重免疫检测（如Luminex）在技术原理上有何本质区别？

 

A：核心区别在于信号生成机制。Luminex依赖荧光编码微球和荧光标记抗体，而Olink通过DNA编码抗体产生可扩增的核酸信号。PEA技术的邻位延伸步骤要求两个抗体在空间上足够接近才能产生信号，这大幅降低了非特异结合。此外，DNA信号的指数扩增特性使Olink灵敏度提高100-1,000倍，且动态范围更宽。

 

Q2. Olinkdànbáizhì组学数据与转录组数据整合分析时需要注意哪些关键问题？

 

A：需考虑三个维度的差异：首先，mRNA与蛋白水平的调控存在翻译后修饰和蛋白降解等差异；其次，Olink检测的是分泌蛋白和胞外蛋白，而转录组反映细胞内信号；zuì后，技术灵敏度差异要求采用适当的归一化方法（如ComBat校正批次效应）。建议采用多组学整合工具（如MOFA+）分析协同变化模式。