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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
广州华韵生物科技有限公司
- 运输方式:
常温/干冰
- 规格:
T25/瓶
小鼠外周血树突状细胞(成熟DC细胞)
Cat NO.: CP-M193B
1.产品名称:小鼠外周血树突状细胞(成熟DC细胞)
2.组织来源:外周血
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
小鼠外周血DC细胞分离自外周血,由外周血单核细胞诱导而成的;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞,典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落,细胞大而形态不规则,表面皱褶多,亦可见少量短刺状突,胞内细胞器丰富并可见吞噬泡,具有较强的迁移能力,伴随有部分未完全诱导成的单核细胞,贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成,多数呈悬浮生长, 细胞呈圆形,细胞体积进一步增大,表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 ),伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,进而激活T淋巴细胞,诱导免疫应答,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节;未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力,但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答,不能激活T细胞的第二信号,可导致T细胞无能,从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低,一般在30%以下。
5.方法简介:
华韵实验室分离的小鼠外周血成熟DC细胞采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
6.质量检测:
华韵实验室分离的小鼠外周血树突状细胞(成熟DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定、细 胞 形态等综合鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
| 包被条件 | |
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
| 产品货号 | CM-M193B |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 半贴半悬浮 |
| 细胞形态 | 圆形,树突状 |
| 传代特性 | 属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
小鼠外周血树突状细胞(成熟DC细胞)体外培养周期有限;建议使用华韵配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
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文献和实验是同一类细胞。 由于缺乏DC特异性标记物,目前仍然不清楚DC是否是自成一系的一类细胞。DC细胞既可以由成熟的外周血单核细胞生成,也可以由未分离的CD34+干祖 细胞经GM-CSF和TNF-a培养得到。使用CD123抗体,发现有一群CD34+ DC样幼稚细胞。这群细胞与CD34+干祖细胞的区别是可以发育成Langerhan细胞样DC。因此,根据CD123强染,可以识别出一类人类DC细胞,它是不同组织间DC细胞的连接桥梁。 在外周淋巴组织中还发现另一个DC亚群,与CD123+ DC不同
股骨和胫骨。 4. 取出骨上组织。 5. 冲洗骨髓腔,直至骨变白。 6. 收集的细胞沉淀一10 000/ml接种,培养液含200 U/ml rmGM-CSF和IL-4。 7. 隔天换液并补充细胞因子,到第三天的时候如图:可以见到出芽状的突起,突起还不是特别多,也不是很长。 8. 第8天的时候,细胞形态已经出来,如图所示: 细胞形态具有典型的树突状细胞形态,长长的突起,到这个时候细胞已经比较成熟了,补充一下:第七天半量换液的时候,加入TNF
养BMDC有好几个月了,看了2、3篇文献就开搞,发现论坛里还是有一些战友养这个。就想开个专题讨论贴,请新手老手都上来谈谈经验或者问些问题。集思广益,大家相互促进下。 我在论坛里看到因为有战友养DC看百把篇文献的,感到佩服又奇怪,就BMDC的培养我目前只知道有个经典版本和改良版本。 我用的是改良版本,参考文献改天附上(可能养这个的战友大多看过了)。 1. 取小鼠股骨胫骨,小鼠要年轻!(6W-8W,以前用只一年左右的养出来外形也张牙舞爪,但流式检测没有CD11c表达,很奇怪
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