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上海科顺
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9999
- 检测范围:
酶联免疫
双抗夹心法ELISA 原理:双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子,但不适用于小分子抗原。将特异性抗体(捕获抗体)与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。加入待检样品,保温孵育。样品中的特异性抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。加酶标抗体(检测抗体)保温孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。加底物反应。 双抗原夹心法测抗体的反应模式与测抗原相似,用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。
优点:高特异体 性,使用的捕获抗体与检测抗体都是检测特异性的;适用于复杂样品,抗原不需要进行纯化即可用于检测;灵活性更大,灵敏度更高,可采用直接法也可采用间接法。
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文献和实验此反应由3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde 3-phosphatedehydrogenase)催化3-磷酸甘油醛氧化脱氢并磷酸化生成含有1个高能磷酸键的1,3-二磷酸甘油酸,本反应脱下的氢和电子转给脱氢酶的辅酶NAD+生成NADH+H+,磷酸根来自无机磷酸。 (7)1.3-二磷酸甘油酸的高能磷酸键转移反应 在磷酸甘油酸激酶(phosphaglycerate kinase,PGK)催化下,1.3-二磷酸甘油酸生成3-磷酸甘油酸,同时其C1
Ultrasonic, Danbury, CT)。 ( 9 ) NiNTA-琼脂糖(NTA:nickel- nitrilotri-acetic acid,镍-三乙酸基氨,Qiagen)。 ( 10 ) 1 ml 聚丙烯柱(Qiagen, Hilden,Germany) 。 ( 11 ) Bradford 试剂(Bio- Rad, Munich, Germany) 。 2.2 蛋白质芯片上的激酶检测 ( 1 ) TBS + Tween ( TBST ):10 mmol/L Tris
,也不通过种子传播,增加了该系统的安全性。上述内容介绍了 RNAi 和 VIGS 在单细胞研究中的优点,若用于分析整个组织基因功能,或者研究植物中稳定遗传改变的试验,RNAi 诱导基因沉默系统仍然是首选的方法。 含有基因表达盒的 RNAi 和 VIGS 越来越多地应用于反向遗传学研究,作为研究方法的一部分用以鉴定基因功能。研究证明,在多种植物体系中,它们可有效地干扰基因表达,包括水稻 [26 ] 、大麦 [ 29 , 30 , 3;3 ] 和小麦 [ 22 , 34,40 ] 等禾谷类
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